同工酶技术在粉螨分类中的应用（蜱螨亚纲：粉螨总科）

【摘要】：本文以五种粉螨为实验材料,辅以普通肉食螨和桔全爪螨为对比,采用垂直板型聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对常见同工酶EST、MDH、AMY、ADH、CAT等进行比较研究。实验探讨了粉螨不同样品匀浆液同工酶比较、不同样品浓度同工酶比较、不同饥饿状况下粉螨同工酶比较、不同种类粉螨同工酶比较、同种粉螨不同发育时期同工酶比较、不同地域粉螨同工酶比较。实验结果表明:使用pH7.4的0.01M的磷酸缓冲液制备样品实验效果最佳;粉螨取样时,通常采用样品与匀浆液体积比1:10浓度配比,低于此浓度则容易造成酶带缺失;粉螨制样时,饥饿对实验效果影响不明显,通常无须饥饿处理样品;不同种类间的粉螨酶带具有多样性,存在不同程度的相似相异性,为粉螨的分类鉴定提供了新的证据,EST-21,MDH-7,8,9,10,12,13,18是粉螨总科的特征谱带,控制着其特有的性状,粉螨科中的腐食酪螨与奥氏嗜木螨、椭圆食粉螨亲缘关系较奥氏嗜木螨与椭圆食粉螨间的更近,推测奥氏嗜木螨与椭圆食粉螨是由食酪螨属分化出来的,CAT酶谱反映了四种粉螨的耐药性的差异,AMY酶谱清晰度不够,分离不甚理想,科属种间的差异以及遗传距离与形态分类基本吻合;同种粉螨不同时期的同工酶酶带基本相同,为此种粉螨的特征谱带,但各酶带活性各有不同,同时也有部分酶带是各个时期所独有的,表明采用幼螨进行种类鉴定的可行性,为分析各发育阶段生理差异提供了依据;不同地域粉螨酶谱没有出现明显的差异。