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磷脂酰胆碱的提取、纯化和分析研究

罗珍  
【摘要】:磷脂酰胆碱(phosphotidylcholine,PC)是磷脂中起重要营养保健作用的主要成分,具有非常重要的生物学活性。磷脂酰胆碱,俗名卵磷脂,由甘油基、脂肪酸基团、磷酸基和胆碱构成。不仅为人体生长发育提供必需的磷元素,而且还是胆碱和必需脂肪酸的主要来源,而胆碱对于人脑的发育形成和维持脑正常功能不可缺少。它还含有亲水的磷脂基团和亲油的脂肪酸基团,是典型的两性化合物,有着良好的乳化功能。在医学上有很高的医用价值,能预防和治疗高血脂、高胆固醇、脂肪肝,在保护细胞膜、抗氧化、抗衰老等方面起着重要作用。另外,在化工、轻工、食品工业等方面应用很广。 本文以大豆油脂加工的副产品浓缩磷脂为原料,深入探索高含量PC的提取纯化方法,主要研究了全溶剂法、超临界CO_2法、柱层析法等,为中试生产提供理论依据;关于检测方法,主要研究了HPLC法、TLC法测定PC,具有非常重要的经济价值和理论意义;对柱纯化后的收集液进行纯度鉴定、光谱分析及其脂肪酸种类的测定,以大致确定PC的分子结构。主要研究内容与所得结果如下: 1.采用全溶剂法提取纯化PC。先用丙酮除去原料中的脂肪酸和部分杂质,得到淡黄色粉末状磷脂,以室温下提取3~4次为宜;再用乙醇试剂提取,以分光光度法测定的磷含量为评价指标,通过均匀设计优化试验条件,考察了提取温度、提取时间、乙醇浓度和料液比四因素对提取的影响,结果发现乙醇浓度对提取得率有显著影响,最佳工艺条件为:100%无水乙醇,料液比1:8,在50℃热水浴中提取25min,产品经HPLC法测定,PC含量为33.4%;采用乙醇冷冻提取法,以HPLC法测定的PC含量为评价指标,通过正交实验设计考察乙醇浓度、料液比和提取时间等因素在不同水平下对PC含量的影响,并进行方差分析和显著性检验,结果显示最佳工艺组合为A_2B_3C_3,即93%乙醇溶液,料液比1:3,冷冻条件下提取8.5h,在此纯化条件下PC的含量提高到了75%,得率为18%左右。 2.采用超临界CO_2法纯化PC。以丙酮处理过的产品作原料,采用超临界CO_2法进行提取,可以提取出油脂,但丙酮不溶物含量测定提高不明显,可能原料中的油脂含量低;为了考察超临界法萃取PC的可行性,以处理过的产品为原料,使用夹带剂无水乙醇,再次进行提取,以HPLC法检测结果为依据,考察了提取次


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