探讨核糖体蛋白RPL36的突变对酵母细胞生长的影响

【摘要】： 真核生物核糖体生物发生(biogenesis)是一个高度复杂和协同进行的过程。近年研究显示许多核糖体蛋白参与了pre-rRNA的剪切成熟(processing)、核糖体亚基的组装和核糖体的翻译功能。但是对核糖体蛋白影响核糖体生物发生及其功能的详细机制仍不清楚。最近发表的一项以酵母核糖体蛋白RPS14为对象的研究，为我们探讨核糖体蛋白对核糖体生物发生的影响提供了一个模型。在本课题中，我们利用同源重组的方法将酵母菌中内源的两个RPL36基因(RPL36A和RPL36B)敲除，同时为了使敲除菌株能够存活，我们转入了一个含有野生型RPL36B基因的Ura标记质粒。然后应用质粒更换的技术将七个突变RPL36B基因导入缺失菌株以替换含野生型RPL36B基因的Ura标记质粒，使得突变的RPL36蛋白成为细胞内唯一的RPL36蛋白来源。在此背景下，我们检测到四个RPL36蛋白的突变明显影响了酵母细胞生长。今后我们将利用这些具有表现型的突变菌株为材料，探讨RPL36蛋白的突变对pre-rRNA的剪切成熟、核糖体亚基的组装以及对核糖体功能的影响。这些知识的积累，将有助于我们更深入地了解核糖体蛋白在真核生物核糖体结构和功能中扮演的角色。