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黑灵芝孢子粉的化学组成及其破壁新工艺研究

黄璞  
【摘要】:近年来国内外对于灵芝孢子的研究,多集中在赤芝孢子,而对黑灵芝孢子研究尚未见报道。本文以江西黑灵芝孢子粉为研究对象,经过一系列破壁、脱脂、脱蛋白、水提等技术得到了黑灵芝孢子多糖,利用毛细管气相色谱法对这种多糖的单糖组成进行了研究,同时对黑灵芝孢子多糖的最佳破壁技术、提取技术和含量测定方法进行了研究,并结合不同测定方法对孢子粉中微量元素、脂肪、蛋白质、氨基酸等其他有效成分进行了含量测定,以期了解黑灵芝孢子粉的有效成分和性质,为更加广泛和充分的开发黑灵芝孢子粉这一宝贵的自然资源提供研究基础。现将本文主要研究结果归纳如下; 1、研究黑灵芝孢子粉多糖的微波提取工艺,在单因素实验基础上,选择提取温度、提取时间以及水料比为自变量,多糖提取率为响应值,采用中心组合设计的方法,研究各自变量及其交互作用对多糖提取率的影响。利用SAS和响应面分析相结合的方法,模拟得到二次多项式回归方程的预测模型,并确定微波提取多糖最佳工艺条件为;温度129℃、时间27min、水料比为31;1,在此条件下,多糖提取率达到2.64%。 2、建立了蒽酮-硫酸法测定黑灵芝孢子中多糖含量方法。用精制黑灵芝孢子多糖测得黑灵芝孢子多糖对葡萄糖的换算因子。结果表明,此法简单可行,供试液在2h内显色稳定,重现性好,平均回收率为96.27%,RSD为1.26%(n=5)。 3、采用GC分析了黑灵芝孢子多糖单糖组成。结果表明,黑灵芝孢子多糖是由岩藻糖(Fuc)、甘露糖(Man)、葡萄糖(Glu)、半乳糖(Gal)组成,组成比例为;1;1.19;5.42;1.76。 4、采用微波消解法处理样品,应用ICP-AES法对黑灵芝孢子中22种元素进行了含量测定。结果显示,由于As、Be和Mn等3种元素的含量低于检测限,而未能检出,其余19种元素在黑灵芝孢子中均有不同含量的分布,说明黑灵芝孢子中无机元素含量丰富。测定结果显示ICP-AES法测定无机元素,精密度好良好,RSD值在0.97~3.69%之间。测定黑灵芝孢子粉中灰分含量,结果显示,黑灵芝孢子中灰分平均含量为3.81%。 5、采用回流法测定黑灵芝孢子中的总脂肪含量,凯氏定氮法测定了黑灵芝孢子中的蛋白质含量,应用高效阳离子交换色谱-柱后衍生法(HPCEC)测定黑灵芝孢子中氨基酸含量进行测定和比较。结果表明,黑灵芝孢子中总脂肪含量为2.90%;蛋白质含量为13.58%;含有所能检测的全部17种氨基酸,氨基酸总量为127.98mg/g,其中蛋氨酸的含量最高,达到84.04mg/g。 6、系统研究了黑灵芝孢子粉破壁工艺、特点及影响破壁率的因素,结果表明,影响破壁率的主要因素有粉碎时间和粉碎转速。黑灵芝孢子超微粉碎破壁的最佳工艺是;转速为2100r/min、粉碎时间为20min时,灵芝孢子壁破碎效果最好,破壁率可以达到95%。同时结合显微镜、扫描电镜、红外光谱、粒度测定等物理测试技术和蒽酮-硫酸法对黑灵芝孢子粉破壁前后的形态表征及多糖含量进行了比较。结果表明,黑灵芝孢子粉破壁效果良好,孢壁被打碎,孢子内含物质呈团状溶出。


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