收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

iNOS抑制剂1400W对人肝癌细胞SMMC-7721增殖及VEGF表达的影响

邢宏松  
【摘要】: 目的 研究诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)选择性抑制剂1400W对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。 方法 1.体外正常培养条件下,分别采用不同浓度(12.5,25, 50, 100, 200 ,400μmol/L)的1400W对SMMC-7721细胞分别进行干预,24h,48h,72h后,采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测各组人肝癌细胞株SMMC-7721体外增殖的改变;流式细胞仪(FCM)分析各组人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及细胞凋亡的变化;硝酸还原酶法测定各组人肝癌细胞株SMMC-7721培养上清液中一氧化氮(Nitric oxide NO)水平变化;RT-PCR检测各组人肝癌细胞株SMMC-7721中iNOS和VEGF mRNA含量的改变。 2.体外缺氧培养条件下,根据MTT结果,分别采用不同浓度(50, 100, 200μmol/L)的1400W对SMMC-7721细胞分别进行干预,24h后用硝酸还原酶法测定各组人肝癌细胞株SMMC-7721培养上清液中NO水平;RT-PCR检测各组人肝癌细胞株SMMC-7721中iNOS和VEGF mRNA的含量改变。 结果 1. MTT检测结果显示,不同浓度1400W对细胞生长均有抑制作用,且同一时间各组与对照组相比差异有显著性(P0.05);1400W对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用呈一定的剂量-时间效应依赖关系。50μmol/l、100μmol/l、200μmol/l、400μmol/l1400W作用细胞72h后抑制率分别为16.42%、25.37%、31.34%、34.33%。 2.细胞周期分析显示,50μmol/l、100μmol/l、200μmol/l 1400W处理细胞48h后,与对照组相比,G0/G1期细胞明显增多(P0.05),S期细胞明显减少(P0.05),且1400W浓度越高,该作用越强,其中200μmol/l 1400W处理细胞48h后, G0/G1期细胞为76.48%±0.14,S期细胞为18.34%±0. 20;同时1400W还能诱导SMMC-7721细胞凋亡, 100μmol/l、200μmol/l 1400W处理细胞48h后凋亡率分别为4.52%±0.28、9.14%±0.31。提示,不同浓度1400W对细胞生长抑制作用可能与细胞生长周期受抑制有关。 3.硝酸还原酶法检测结果显示,体外常规条件培养下,不同浓度1400W处理细胞后,对细胞NO释放均有抑制作用,且同一时间各组与对照组相比差异有显著性(P0.05),1400W对SMMC-7721细胞NO释放的抑制作用,在实验范围内呈剂量-时间效应依赖关系;其中50μmol/l、100μmol/l、200μmol/l、400μmol/l 1400W作用细胞72h后,细胞培养上清液中NO含量分别为36.36±1.4、33.23±1.5、29.55±2.2、21.59±3.0μmol/l。缺氧条件培养下,50μmol/l、100μmol/l、200μmol/l 1400W处理细胞24h后,细胞培养上清液中NO含量分别为28.77±2.1、21.63±3.0、17.23±2.4μmol/l,与对照组相比,NO含量明显降低(P0.01),呈剂量-效应依赖关系。 4. RT-PCR检测结果显示:(1)体外常规培养条件下,对照组、50μM组、100μM组、200μM组处理细胞48h后, iNOSmRNA表达量分别为0.217±0.038、0.170±0.030、0.145±0.030、0.085±0.031;VEGFmRNA表达量分别为0.446±0.016、0.341±0.022、0.261±0.034、0.190±0.036。各组浓度的1400W均能抑制iNOSmRNA表达(P0.05)、VEGFmRNA表达(P0.05)。(2)体外缺氧培养条件下,对照组、50μM组、100μM组、200μM组处理细胞24h后, iNOSmRNA表达量分别为0.246±0.009、0.212±0.009、0.169±0.012、0.136±0.006;VEGFmRNA表达量分别为0.598±0.040、0.429±0.038、0.309±0.022、0.249±0.014。各组浓度的1400W均能抑制iNOSmRNA表达(P0.05)、VEGFmRNA表达(P0.05)。 结论 选择性iNOS抑制剂1400W可抑制体外人肝癌细胞株7721体外增殖,促进细胞的凋亡,机制可能与其阻止细胞周期进展和抑制VEGF表达有关。提示1400W对肝癌生长和转移可能有抑制作用。为筛选选择性iNOS抑制剂类似物临床靶向治疗原发性肝细胞肝癌提供了初步的实验依据。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 雷水生;涂亚庭;朱晓琴;胡志国;;皮肤血管瘤中NOS和VEGF的表达及其与血管增生的关系[J];中国皮肤性病学杂志;2007年10期
2 徐云根,罗穗,华维一;诱生型一氧化氮合酶选择性抑制剂的研究[J];药学进展;2000年03期
3 韩文杰;文小军;;诱生型一氧化氮合酶及一氧化氮对心脏的作用[J];新乡医学院学报;2006年06期
4 常明,刘书馨,杨溟,王志宏,刘焱;高糖对系膜细胞诱生型一氧化氮合酶表达及细胞外基质合成的影响[J];中国中西医结合肾病杂志;2005年04期
5 廖明芳,景在平,赵新,张素贞;诱生型一氧化氮合酶调节体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞中MMP的表达[J];介入放射学杂志;2003年04期
6 聂本勇,郑茂荣,范青源,陶苏江,顾军,牟贤龙;TNF-α和IL-1β对HaCaT细胞诱生型一氧化氮合酶表达的影响[J];中国皮肤性病学杂志;2004年02期
7 吴亚光,吴泰璜,刘洪俊,穆庆岭;原发性肝细胞癌分化程度与诱生型一氧化氮合酶表达的关系[J];中华实验外科杂志;2001年02期
8 李缠生;NF-κB及iNOS与肾脏疾病[J];国外医学.泌尿系统分册;2002年01期
9 钱孝贤;血管内皮生长因子与心血管疾病[J];国外医学.内科学分册;1999年04期
10 陈筱潮,张旭明,伍卫,刘英梅,邓庆丽;充血性心力衰竭犬心肌诱生型一氧化氮合酶的表达[J];中山医科大学学报;2000年03期
11 覃天新,刘运广;血管内皮生长因子在缺血性脑血管病的应用前景[J];右江民族医学院学报;2000年04期
12 赵献国;张可成;路战虎;;血管内皮生长因子在星形细胞瘤中表达及其意义[J];沈阳部队医药;2000年02期
13 李宪章,张爱梅,赵爱玲,阮喜云,靳光娴,孙卓祥;脑梗死患者血清血管内皮生长因子的动态变化[J];中国神经免疫学和神经病学杂志;2002年01期
14 李小薇;吕申;;血管内皮生长因子与卵巢癌[J];沈阳部队医药;2002年01期
15 ;糖尿病性昏迷及其他并发症[J];国外科技资料目录(医药卫生);2002年04期
16 ;肾疾病[J];国外科技资料目录(医药卫生);2002年08期
17 韦方,耿庆山,周钢,符永恒,谭红红,余细勇;冠心病患者血清血管内皮生长因子水平与冠状动脉病变程度的关系[J];临床心血管病杂志;2003年03期
18 徐旭;蓝平;高明宏;范忠义;;角膜新生血管形成中血管内皮生长因子的表达[J];沈阳部队医药;2003年02期
19 王艳姣,杨宇,张湘瑜,傅柳英;阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者血浆血管内皮生长因子浓度测定(英文)[J];中国现代医学杂志;2004年13期
20 申兴斌,王瑞婷,金小平,于再东;大肠正常粘膜、腺瘤及癌组织中VEGF表达的意义[J];承德医学院学报;2005年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 封巍;祝淑钗;郑晓;王玉祥;王准;王鑫;;阻断血管内皮生长因子表达对食管癌细胞放射敏感性的影响[A];2009年浙江省放射肿瘤治疗学学术年会论文汇编[C];2009年
2 贾军;杨世勇;张志明;;血管内皮生长因子在食管鳞癌中的表达及临床意义[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年
3 邢卫杰;李予;王文军;麦美琪;杨冬梓;张清学;;血管内皮生长因子对大鼠卵巢组织自体移植后的形态与功能的影响[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];2007年
4 赵永忠;王波;王天才;;血管内皮生长因子在实验性胆汁性肝硬化形成过程中的作用[A];第二届全国人工肝及血液净化学术年会论文集[C];2005年
5 张清媛;康欣梅;赵文辉;;雌激素及其拮抗剂对乳腺癌血管内皮生长因子的转录调节作用[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
6 赵康;麻柱;;血管内皮生长因子对哺乳动物生殖的影响[A];中国奶牛协会2007年会论文集(上册)[C];2007年
7 刘耀煌;方志军;方向明;朱慧星;方金峰;徐如意;周虹;;肝细胞癌患者血清VEGF和NO含量测定及其临床意义[A];湖北省暨武汉市微生物学会分析微生物专业委员会第十届第五次学术会议论文汇编[C];2008年
8 陈文明;朱嘉芷;Soria J;Mirshahi M;;维生素D3对血管抑制新生作用的研究[A];第三届全国血液免疫学学术大会论文集[C];2003年
9 赵海燕;陈宝元;曹洁;冯靖;;间歇低氧对人脐静脉内皮细胞中血管内皮生长因子的影响[A];2008年中国睡眠研究会第五届学术年会论文摘要汇编[C];2008年
10 刘绍能;时磊;李敏;吕鑫霞;阚杰;马继征;陈兰羽;;芪术颗粒对大鼠肝纤维化形成过程中血管内皮生长因子动态变化的影响[A];第二十一届全国中西医结合消化系统疾病学术会议暨国家级中西医结合消化系统疾病新进展学习班论文汇编[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李艳;糖尿病大鼠视网膜VEGF、PEDF表达与神经细胞及血—视网膜屏障损伤的研究[D];天津医科大学;2006年
2 李曦铭;基因重组hVEGF165腺相关病毒的构建及其在间充质干细胞和心肌细胞中的表达[D];天津医科大学;2006年
3 孔怡淳;氧诱导视网膜病变的发病机制研究[D];天津医科大学;2006年
4 陶波;喉癌前病变中医证候与iNOS和VEGF表达关系及金喉片治疗的研究[D];广州中医药大学;2006年
5 方秀统;BMP-2和VEGF-165双基因共转染大鼠骨髓基质干细胞体内成骨的实验研究[D];吉林大学;2006年
6 崔正军;腺病毒载体介导的反义VEGF_(165)基因治疗人皮肤恶性黑色素瘤的实验研究[D];四川大学;2004年
7 金雪瑛;Apigenin对人乳腺癌细胞VEGF表达的影响及相关作用通路[D];中国医科大学;2007年
8 杨宏辉;VEGF转染对骨髓间质干细胞及对粥样硬化动脉TFPI的影响[D];中南大学;2007年
9 李建峰;实验性脊髓空洞前状态形成机制的分子生物学研究[D];河北医科大学;2005年
10 王琦;正常胰腺和胰腺癌多层螺旋CT灌注成像的临床及实验研究[D];中国医科大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 邢宏松;iNOS抑制剂1400W对人肝癌细胞SMMC-7721增殖及VEGF表达的影响[D];南昌大学;2008年
2 骆仙芳;保肺定喘汤对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道重构干预作用的研究[D];浙江大学;2005年
3 冯建军;COX-2及VEGF在人膀胱移行细胞癌中的表达及意义[D];福建医科大学;2005年
4 冯青俐;肝细胞生长因子与急性冠脉综合征的相关性研究[D];郑州大学;2005年
5 王文栋;人子宫内膜癌中血管内皮生长因子和雌激素受体的表达及相关性探讨[D];山东大学;2005年
6 张辉;VEGF, PCNA蛋白表达与垂体腺瘤的生物学行为关系的研究[D];山东大学;2005年
7 许国星;膜引导骨再生过程中VEGF表达的实验研究[D];山东大学;2005年
8 朱永林;复方丹参片对慢性脑缺血大鼠脑内PDGF-B、VEGF表达的影响[D];郑州大学;2005年
9 邵志强;缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子在肾细胞癌组织中的表达及意义[D];第一军医大学;2005年
10 肖凤春;青蒿琥酯抑制人结肠癌细胞的生长及其机制的初步研究[D];浙江大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 张中桥;卵巢癌与血管内皮生长因子有关[N];民族医药报;2000年
2 ;小儿肾母细胞瘤血管内皮生长因子的表达及临床意义[N];中国医药报;2003年
3 齐继成;2004年可以期待的新药[N];中国医药报;2003年
4 吴一福;基因治疗在创伤修复领域的应用[N];中国医药报;2003年
5 王建;大麻提取物可抑制肿瘤[N];中国劳动保障报;2004年
6 郑屠编译;罗氏获得抗肿瘤药授权[N];医药经济报;2003年
7 汤旸 丁鼎乐 编译;基因泰克二季度收益暴涨[N];医药经济报;2004年
8 蒲昭和;饮茶防癌的奥秘[N];中国医药报;2001年
9 ;川芎嗪联合氨基胍对糖尿病肾病有治疗作用[N];中国中医药报;2004年
10 沈兴;“饿死肿瘤”技术成果以400万元被转让[N];中国高新技术产业导报;2001年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978