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早期肠内营养对实验性重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障与肺损伤的影响

龙顺华  
【摘要】: 目的:探讨早期(胰腺炎造模后12小时)肠内营养(early enteral nutrition,EEN)对于实验性重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障(intestinal mucosal barrier,IMB)及肺损伤的影响。 方法:将48只健康雄性Sprague-Dawley大鼠,体重180-200g,随机分为实验对照组(sham operation group,S组)、肠外营养组(parenteral nutrition group,PN组)、造模后12小时行肠内营养组(early enteral nutrition group,EEN组)和造模后24小时行肠内营养组(enteral nutrition group ,EN组)。另外取32只健康雄性SD大鼠(体重180-200g),随机平均分入上述四组,以观察5d生存率。采用从胰腺被膜下多点缓慢均匀注入3.8%牛磺胆酸钠1ml建立SAP模型,分别于造模后第3、5d两个时间点采用腹主动脉放血法将大鼠分批处死(每次每组6只),收集血标本送检血淀粉酶;部分血清样本保存于-80℃,以备DAO、TNF-α检测,部分血浆样本保存于-80℃,以备D-乳酸检测;同时将胰腺、回肠、肺组织置于10%中性甲醛溶液中固定,在光镜下观察胰腺组织、回肠组织、肺组织的病理学改变并作病理评分;回肠组织置于2.5%戊二醛溶液中固定,观察电镜下形态学改变;免疫组化法检测肺组织TNF-α表达,并观察早期肠内营养对上述各指标的影响。 结果: 1、四组大鼠5d的生存率: S组5d大鼠的生存率是100%,PN、EN、EEN组造模后的生存率分别为50%、62.5%、75%,S组与其余三组的生存率的比较有显著性差异(P0.01);而PN、EN、EEN组之间生存率相比较,差异无统计学意义(P0.05),说明早期肠内营养是安全的。 2、血清淀粉酶变化:造模后PN、EN、EEN组血淀粉酶水平在各时间点均显著升高,与S组比较有显著性统计学差异(P0.01);在各时间点,EEN、EN组与PN组比较,淀粉酶含量虽有降低,但无统计学意义(P0.05);EEN组与EN组相比,差异也无统计学意义(P0.05)。 3、胰腺组织学评分:①S组评分低,各时间点无明显变化。②P N、EN、EEN组评分各时间点与S组比较有显著性统计学差异(P0.01)。③与PN组相比,EN、EEN组评分低,EEN 3d组、EN 5d组与相应时间点PN组相比有统计学差异(P0.05),在5d EEN组与PN组相比有显著性统计学差异(P0.01)。④在5d EEN组与EN组相比有统计学差异(P0.05)。 4、肺组织形态学改变:PN、EN、EEN组第3天可见肺泡隔明显肿胀、间质充血,可见出血,大量炎症细胞浸润,肺实变明显,肺大泡形成;第5天仍可见肺泡隔明显肿胀、间质充血,可见出血,大量炎症细胞浸润,肺实变明显,肺大泡形成,但较第3天轻;PN组较EN、EEN组稍重,但无统计学差异(P0.05)。EN与EEN组相比无明显差别,也无统计学差异(P0.05)。 5、回肠组织光镜下形态学改变:在第五天时,PN组肠黏膜厚度、绒毛高度与EEN组相比较,明显降低,有显著性差异(P0.01);EEN组的肠黏膜厚度及绒毛高度与EN组比较也有统计学差异(P0.05)。 6、回肠组织电镜下改变:PN组第3天可见微绒毛稀少、排列紊乱,紧密连接增宽;第5天微绒毛稀少、排列紊乱,紧密连接肿胀、破坏。EEN、EN第3天微绒毛稀少、排列紊乱,紧密连接未见异常;EEN、EN第5天可见微绒毛增多,排列整齐,紧密连接未见异常。 7、血清TNF-α水平变化:①S组大鼠血清TNF-α水平较低,在造模后各时间点无显著性变化,且在各时间点上明显低于PN、EN、EEN组,差异均有显著性统计学意义(P0.01)。②EEN 3d组、EN 5d组与相应时间点PN组相比有统计学差异(P0.05),在5d时EEN组与PN组相比有显著性统计学差异(P0.01)。③在5d时EEN组与EN组相比有统计学差异(P0.05)。 8、血D-乳酸的变化:S组大鼠D-乳酸水平较低,在造模后各时间点无显著性变化,且在各时间点上明显低于PN、EN、EEN组,均有显著性统计学意义(P0.01);三组胰腺炎诱导后D-乳酸均增高,在3d、5d时EEN组的D-乳酸水平较PN组有明显降低,差别有显著性统计学意义(P 0.01);在3d时EN组较PN组有明显降低,差别有统计学意义(P0.05);5d时EN组较PN组也有明显降低,差别有显著性统计学意义(P0.01); 5d时EEN组的D-乳酸水平较EN组有改善,差别有统计学意义(P0.05)。 9、血DAO的变化:①P N、EN组在3d、5d时间点上明显低于S组,差异均有显著性统计学意义(P0.01)。②在3d时EEN组较PN组有升高,差别有统计学意义(P0.05);5d时EEN组较PN组也有明显升高,差别有显著性统计学意义(P0.01)。③在5d时EN组的血清二胺氧化酶水平较PN组高,差别有统计学意义(P0.05)。④5d后EEN组回升到与S组无显著性差别;5d时EEN组的血清二胺氧化酶水平较EN组高,差别有统计学意义(P0.05)。 10、肺组织TNF-α表达变化:造模后PN、EN、EEN组肺组织TNF-α水平与S组相比,在各时间点均显著升高(P0.01), EN、EEN三组3d、5d与PN组相比均无统计学差异(P0.05)。 结论: 1、EEN没有加重胰腺炎病情,是安全、可行的,可以在早期应用。 2、EEN可以更好保护肠黏膜屏障。 3、EEN、EN组肺损伤较PN似有减轻趋势,但三组比较无统计学意义。


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