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雷公藤内酯醇对AD细胞模型中小胶质细胞NF-κB的表达及海马神经元凋亡的影响

聂菁  
【摘要】: 目的: 研究雷公藤内酯醇(triptolide ,TP)对阿尔茨海默病细胞模型中小胶质细胞核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)及其抑制因子NF-κB抑制蛋白α(InhibitoryκBα,IκBα)的表达的影响,探讨雷公藤治疗AD的可能机制。 方法: 用终溶度为20μl/L的Aβ1-40诱导体外培养的原代小胶质细胞。应用免疫细胞化学方法、图像分析技术,观察不同剂量(5μg/ml、25μg/ml)的雷公藤内酯醇在不同时程内(2 h、12 h、24 h)对Aβ1-40诱导的小胶质细胞NF-κB及其抑制因子IκBα表达的影响,用正常组对照。 结果: 加药2 h后各组之间NF-κBp65累积光密度(integrated optical density,IOD)无明显差异; 12 h、24 h后,模型组NF-κBp65 IOD值相对于正常组显著升高(P0.01),低剂量用药组NF-κBp65 IOD值与模型组比较显著降低(P0.01),但仍高于正常组(P0.01),高剂量用药组NF-κBp65 IOD值与模型组比较显著降低(P0.01),与正常组相比较无明显统计学差异(P0.05),高剂量用药组NF-κBp65 IOD值与低剂量用药组相比较有明显的下降(P0.05,P0.01)。各组细胞IκBα表达的变化与NF-κBp65基本相一致。 结论: 雷公藤内酯醇对Aβ1-40诱导的小胶质细胞中NF-κB的活化具有抑制作用,与雷公藤内酯醇的浓度和作用时间呈正相关性。NF-κB的抑制因子IκBα与其表达的趋势一致。 目的: 研究雷公藤内酯醇(triptolide ,TP)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease ,AD)细胞模型中海马神经元凋亡的影响,探讨雷公藤治疗AD的可能机制。 方法: Aβ1-40刺激小胶质细胞制成小胶质细胞培养液(microglial conditioned medium,MCM),作用于体外培养的海马神经元,建立AD体外细胞模型。加入不同剂量的雷公藤内酯醇,将海马神经元分为模型MCM组、低剂量用药MCM组、高剂量用药MCM组和正常MCM组共四组。应用MTT法、TUNEL染色法检测在不同时程内(2 h、24 h),雷公藤内酯醇对AD细胞模型中的海马神经元的凋亡有何影响,以未加入Aβ1-40和TP的细胞作为正常对照组进行对照。 结果: MCM作用2 h各组海马神经元的凋亡数区别不大,MCM作用24 h后,模型MCM组海马神经元的凋亡数明显高于其它各组,高剂量用药MCM组凋亡数小于低剂量用药MCM组,高剂量用药MCM组、正常MCM组和正常对照组的凋亡数相差无几。 结论: 雷公藤内酯醇对AD细胞模型中海马神经元的凋亡具有抑制作用。


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