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eNOS基因转染兔脑动脉预防蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛的实验研究

伍伟俊  
【摘要】: 目的:通过血管内转染内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因的方法,结合脑动脉及海马组织病理学和超微结构观察,探讨eNOS基因转染对蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的影响及其可能机制。 方法:首先构建携带eNOS基因的重组腺病毒用于实验。采用枕大池二次注血法建立兔蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛模型。通过颈动脉微泵持续滴注方法进行基因转染。动物随机分为四组:正常组:未进行枕大池注血,也无其他干预措施; SAH组:在第0天和第2天枕大池注血制作成SAH后迟发性脑血管痉挛模型;Ads组:第0天SAH造模前血管内滴注腺病毒;AdeNOS组:第0天SAH造模前血管内滴注AdeNOS。各组分别于造模7天后进行灌注固定取脑动脉及海马组织行病理学和超微结构观察;测量大脑中动脉直径,同时免疫组化检测eNOS的表达。 结果:枕大池二次注血法造模后,血液广泛聚积于蛛网膜下腔,以基底池为主;免疫组化证实AdeNOS组第7天重组eNOS基因表达,重组eNOS主要表达于内皮层。第7天脑组织HE染色显示AdeNOS组脑动脉平均直径较SAH组及Ads组增大,海马CA1区神经元较SAH组及Ads组多;电镜下SAH组血管痉挛明显,海马神经元细胞肿胀,结构不完整,细胞核固缩,线粒体空泡化,AdeNOS组损伤明显减轻。 结论:采用颈动脉微泵持续滴注方法转染eNOS基因至兔脑动脉可缓解蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛,改善海马缺血,且这一效应可能通过增加内皮细胞重组内皮型一氧化氮合酶表达水平而实现。


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