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天津地区金黄色葡萄球菌临床分离株的分子进化学研究

张怡滨  
【摘要】: 第一部分:天津地区2001年葡萄球菌临床分离株的分析   金黄色葡萄球菌是临床重要的致病菌,而近年来以表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌和溶血葡萄球菌为代表的凝固酶阴性葡萄球菌则从非致病菌变成了临床上日益重要的致病菌。尤其是多重耐药表型的耐甲氧西林葡萄球菌的分离率不断升高,可供选择的抗生素极少,成为难以治疗的“超级细菌”。不同国家、地区和医院的葡萄球菌感染的情况存在差异,为了了解天津地区的葡萄球菌临床分离株的临床资料和耐药情况,制定有效控制其感染的策略和合理使用抗生素的治疗方案,本研究对2001年天津地区8甲大型医院的葡萄球菌临床分离株进行了分析。 目的:了解天津地区葡萄球菌临床分离株的一般情况,以及耐甲氧西林葡萄球菌临床分离株的耐药特点,为合理使用抗生素提供依据。方法:从天津地区的8家大型医院收集2001年1月~12月的葡萄球菌临床分离株,应用WHOnet软件分析收集到的葡萄球菌临床分离株的特点,采用微量肉汤稀释法测定它们对多种抗生素的敏感性。结果:2001年从天津地区的8家大型医院的门诊和住院患者中共收集葡萄球菌临床分离株303株,其中金黄色葡萄球菌235株,凝固酶阴性葡萄球菌68株。68株CoNS中表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌分占第一、二位。葡萄球菌临床分离株的数目与季节有关,冬季和气候更迭时分离较多。来自男性患者的临床分离株明显高于女性患者,60岁及以上的老年患者的分离株的数量明显高于其它年龄组。葡萄球菌临床分离株主要分离自痰、尿、创口的标本,集中于内科、外科、ICU的患者。235株金黄色葡萄球菌临床分离株中MRSA占47.2%,68株CoNS中MRCoNS占86.8%。老年患者、ICU的患者、住院患者中MRSA的分离率高。金黄色葡萄球菌的院内感染率为23%,CoNS的院内感染率为25%,院内感染金黄色葡萄球菌中MRSA的分离率为64.8%。所有MRSA临床分离株对万古霉素均极敏,对氯霉素和四环素的耐药率低于50%,对其它抗生素的耐药率均 天津医科大学 博士研究生学位论文 比较高。所有 MSSA临床分离株对万古霉素和苯哩西林均敏感,对青霉素、 氨芋青霉素、头抱三喷、林可霉素的耐药率高,对氯霉素、四环素、环丙沙 星、庆大霉素、红霉素的耐药率低。MRCoNS、MSCONS的耐药谱和MRSA、 MSSA相似。结论:金黄色葡萄球菌是临床重要的致病菌,CoNS的分离率 也呈增加趋势。主要引起的疾病为呼吸道感染、泌尿系感染、外科切口和伤 口的感染。感染的危险因素包括:气候变化、年龄、侵袭性操作、留置导管、 ICU等。天津地区葡萄球菌临床分离株的院内感染率偏高,可能与分离株都 是来自于大型医院的住院患者有关。院内感染MRSA、MRC。NS的分离率 与国内外报道基本一致。MRS感染的治疗首选的药物仍是糖肽类抗生素, 必要时可以联合利福平或磷霉素。MSSA、MSC。NS的治疗可以选择第一代 头泡菌素、红霉素、庆大霉素等。 第二部分 天津地区金黄色葡萄球菌临床分离株的分子进化学研究 MRSA的进化过程比较独特,它的产生是由于金黄色葡萄球菌的染色体 整合了一个功能类似抗生素耐药岛的外源性元件SCCmec,它不断通过突变 或捕获抗生素耐药基因、转座于、插入序列来增加耐药谱。SCCmee共分为 4型,前3型来自医院获得性MRSA,IV型来自社区获得性MRSA。目前全 球流行的hlllSA克隆株共有5个:I型Iberian克隆株、11型Brazil克隆株、 Ill型 Hungrian克隆株、IV型 Pediatric克隆株、V型 New YoMapan克隆株。 MLST方法和生物信息学技术可以将MRSA克隆株、遗传背景和进化路线 有机地联系起来。MLST方法分辨能力强,结果确切,便于标准化,在互联 网上己经建立的数据库可以比较不同实验室结果,数据的分析方便而快捷, 是研究 MRSA分子进化的有力手段。为了填补国内 MRSA临床分离株来源 和遗传背景资料的缺乏,本研究应用MLST方法和生物信息学技术对4株 金黄色葡萄球菌临床分离株进行了分子进化学研究。 目的:应用分子进化学方法研究4株金黄色葡萄球菌临床分离株的来源和遗 -3- 天津医科大学 博士研究生学位论文 传背景。方法:生化鉴定、微量肉汤稀释法测定MIC、mecA基因的PCR 扩增、PBPZa平板乳胶凝集法识别MRSA、MSSA,应用MLST方法对4株 金黄色葡萄球菌临床分离株进行ST分型,与业凹凶凶匕切红的数据库中的菌 株资料以及相关文献的菌株资料进行分析。结果:2株金黄色葡萄球菌临床 分离株SA76、SA137对包括苯哇西林在内的多种抗生素耐药,mecA基因 的PCR扩增阳性,PBPZa平板乳胶凝集法阳性,?


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