收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

大鼠高尿酸血症模型的建立与降尿酸中药的筛选

马通军  
【摘要】: 背景与目的 近年来高尿酸血症(hyperuricemia,HU)和痛风(gout)的发病率日益增高,已成为一种常见病。为了避免关节炎反复发作和肾脏病变形成,痛风患者需要长期服用有降低血尿酸(uric acid,UA)作用的药物。但目前安全、有效、经济的降UA药物较少。我国用中草药治疗痛风病虽有悠久的历史,但迄今尚无能够有效降低血UA的中药制剂用于临床。因此,研制新型降UA药物,特别是借鉴中医经验开发有降UA作用的中草药具有重要的意义。 本研究的目的是建立一套适用于筛选降UA药物筛选的系统方法,主要包括适用的HU模型建立方法及相关的RP—HPLC检测方法。在此基础上,参考中医治疗痛风的丰富经验,初步筛选出有降尿酸作用的中草药。全部研究分为四个部分进行: 第一部分:建立用RP—HPLC技术同时检测血、尿嘌呤代谢产物和肌酐的方法。建立HU模型时所使用的药物会严重影响现有的UA检测方法,因此需要首先建立不受建模药物干扰的检测方法。HPLC是新型的检测技术,具有准确、灵敏、可同时检测多种成分的优点。本部分研究选用国产C_(18)色谱柱,探索同时检测次黄嘌呤、黄嘌呤、尿酸、尿囊素和肌酐的方法。 第二部分:建立大鼠高尿酸血症模型。目前尚无统一的高尿酸血症动物模型建立方法。人类高尿酸血症多为肾脏排泄尿酸减少的类型,而现有的建模方法在升高血尿酸的同时,也使尿尿酸含量显著增高。动物模型与人类疾病之间的差别较大,不利于降尿酸药物的筛选。本部分研究利用尿酸酶抑制剂氧嗪酸和抑制肾脏排泄尿酸的药物吡嗪酰胺,建立一种与人类高尿酸血症 天津医科大学博士研究生学位论文 更为接近的高尿酸血症动物模型。 第三部分:痛风中药治疗方剂的统计分析。我国中草药资源丰富,研究 者需要建立科学的方法以便从数以万计的中药资源中快速确定研究的重点。 传统中医的经验值得借鉴,但由于对痛风的认识与现代医学有不同之处,因 此借鉴中医经验应当有所选择。本部分研究依据明确的标准,选出疗效明确 的部分痛风中药治疗方剂,利用统计分析的方法,初步筛选出需要重点研究 的中草药。 第四部分:部分中药对高尿酸血症动物模型尿酸代谢的影响。在前三部 分研究的基础上,利用新型的高尿酸血症动物模型和检测方法,观察部分重 点中草药对UA代谢的影响。 方法 第一部分:用国产CI。反相色谱柱为固定相,以磷酸盐缓冲液(0.OSM, pH=6)为流动相,流速lml/分钟,进样量20林1,柱温保持室温,检测波长 210.Inm一400nm。每份标本检测时间为30分钟。血清标本在检测前需去蛋白, 尿液标本需稀释和过滤。 第二部分:(l)将24只大鼠随机分为4组,分别用尿酸、氧嚓酸、氧 嚓酸+尿酸以及氧嗦酸+毗嗦酞胺4组药物制备模型。每日腹腔注射2次, 连续7天。比较建模前后的尿酸代谢的变化。(2)将18只大鼠随机分为3 组,均腹腔注射氧嗦酸+毗嗦酞胺,每日分别用苯浪马隆、别喋吟醇以及生 理盐水灌胃1次,连续7天。比较三组大鼠建模前后的尿酸代谢变化。 第三部分:(l)按照诊断明确、方法科学、疗效可靠、没有干扰因素的 标准,检索公开发表的中医治疗痛风方剂45个,统计各种中药的使用次数, 选择出使用次数较高的药物。(2)将45个方剂按照疗程和血UA恢复正常的 比例分为A组(疗程短于30天,血UA恢复正常者超过50%的病例数)和B 组(疗程超过30天,血UA恢复正常者少于50%的病例数)。A组方剂26 个,B组方剂19个。统计A组使用次数较多的药物,比较常用药物在两组 使用次数的差别。 天津医科大学博士研究生学位论文 第四部分:将30只大鼠随机分为五组,在腹腔注射氧嚓酸+毗嚓酞胺建 立HU模型的基础上,分别用中汇痛风定、中药l、中药2和中药3每日灌 胃1次。7天后比较尿酸代谢的变化。 结果 第一部分:用R P.H卫LC技术可理想地分离次黄嘿吟、黄嗓吟、尿酸、尿 囊素和肌配,准确性与重复性好。 第二部分:用腹腔注射OA+PZA的方法可以成功建立大鼠高尿酸血症 模型。此方法在显著升高血UA的同时,可使模型尿UA含量显著减少,与 人类高尿酸血症的主要类型更为近似。腹腔注射这种给药方式克服了以往给 药方法剂量不准确和药物浪费的缺点。用此方法建立的高尿酸血症模型不仅 能够筛选降尿酸药物,而且可以初步确定药物的作用机理。 第三部分:从45个痛风中药方剂中初步筛选出16种使用次数显著高于 其他药物的中草药,即苍术、牛膝、慧该仁、黄柏、车前子、土获等、甘草、 草解、防己、赤芍、大黄、泽泻、秦芜、木瓜、忍冬藤、威灵仙。这些药物 可能对UA代谢有影响。16味常用药物中有9味属于清热祛湿药,且多具有 治疗风湿痹痛的作用,提示清热祛湿中药可能具有降尿酸作用。黄柏、草解、 土获荃在疗效显著方剂组的使用次数显著高于疗效较弱方剂组,提示这3味 药物对方剂的疗效有重要影响,可能有降尿酸作用。 第四部分:中药l、中药2有降低血尿酸的作用,其中中药1可减少尿 ?


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 甘志勇;张纯;冯娟;杨晓兰;袁拥华;廖飞;;尿酸酶在用氧嗪酸建立高尿酸血症模型大鼠体内的降尿酸作用[J];重庆医科大学学报;2010年10期
2 武文明;曾昭淳;李小彦;杨小兰;廖飞;;产朊假丝酵母尿酸酶的纯化和特性研究[J];西南大学学报(自然科学版);2008年03期
3 才蕾;高向东;朱姝;王华;姚文兵;;聚乙二醇修饰尿酸酶的研究(英文)[J];中国药科大学学报;2008年06期
4 吴能森;;冠心病患者血尿酸水平变化特点的临床观察[J];中国现代药物应用;2011年12期
5 孙晓军;金磊;甘志勇;刘冬;;PEG-5000修饰后假丝酵母尿酸酶的基本特性[J];中国老年学杂志;2010年19期
6 王娜;谭群友;徐美玲;李艺;赵春景;张景勍;;产朊假丝酵母尿酸酶脂质体的酶学性质及其免疫原性[J];中国生物制品学杂志;2011年05期
7 李晓娟;李依芯;陈建华;;重组尿酸酶部分理化性质及其初步药效学研究[J];药物生物技术;2007年02期
8 杨雅兰;欧阳志强;阳志军;;检测尿液中尿酸含量范围的试纸条的研制[J];中国药师;2007年09期
9 杨阳;王新红;樊爱玲;肖鹏涛;韦晓明;;人类精液中一氧化氮和尿酸含量检测的关系[J];中国优生与遗传杂志;2006年06期
10 周雪玲;尧春茂;;广东省汕尾市区健康成人血清尿酸浓度检测分析[J];中国基层医药;2006年05期
11 李盈淳;朱姝;高向东;才蕾;姚文兵;;氨基末端定点聚乙二醇化尿酸酶的研究[J];药物生物技术;2009年06期
12 周衍权;胡惠廉;;血液之定量分析(九)[J];中国医刊;1955年10期
13 Ts'si-Fan yu;林冰若;;高尿酸血与痛风的尿石病[J];国际泌尿系统杂志;1982年04期
14 刘广桢,陈建华,王旻;尿酸酶产生菌的筛选、基因克隆及表达[J];中国药科大学学报;2005年05期
15 戴冽;;痛风性关节炎的治疗[J];中华内科杂志;2005年11期
16 杨麦贵;杨阳;黄萍;郑善銮;张竹映;郝晓柯;;精液抗氧化物尿酸与生殖细胞凋亡的关系[J];现代检验医学杂志;2006年01期
17 杨阳;王珏;黄萍;肖鹏涛;秦庆;张竹映;樊爱琳;;人精液白细胞密度与活性氧和尿酸的关系研究[J];诊断学理论与实践;2006年04期
18 刘珍清;高新颜;李慧;刘小青;;正常鹌鹑血清血糖、甘油三酯、尿酸参考值生化测定[J];实验动物科学;2007年02期
19 杨麦贵;杨阳;李媛;周茜;肖鹏涛;秦庆;张竹映;郑善銮;韦晓明;郝晓柯;;感染性精液中白细胞与活性氧及尿酸的关系研究[J];中华医院感染学杂志;2007年12期
20 陈伟;唐德燊;;人肾脏尿酸转运机制及影响因素的研究进展[J];广东医学院学报;2009年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈华洁;陈安国;杨彩梅;洪奇华;;樟科、蒜属和丝兰属植物提取物对肉鸡排泄物中脲酶与尿酸酶活性及氨态氮含量的影响[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年
2 李龙;;痛风诊治新认识[A];贵州省医学会风湿病学分会第四届学术年会专题论文汇编[C];2010年
3 袁敏;刘燕;郭荣;;基于纳米金的尿酸生物传感器[A];中国化学会第28届学术年会第12分会场摘要集[C];2012年
4 张娴娴;孙维峰;;泄浊除痹方治疗高尿酸血症疗效分析及对URAT1的影响[A];全国第八届中西医结合风湿病学术会议论文汇编[C];2010年
5 宋文冲;陈超;;虎参痛风丸对小鼠黄嘌吟氧化酶的影响[A];第八届全国生化药理学术讨论会暨第七届Servier奖颁奖大会会议摘要集[C];2003年
6 刘健;何影仪;郑敏玲;;健康体检人群血清尿酸水平6年动态变化分析[A];中国康复医学会第22届疗养康复学术会议论文汇编[C];2011年
7 孙维峰;张娴娴;孙奋勇;徐伟;;复方土茯苓颗粒对高尿酸血症小鼠肾脏microRNA表达的影响[A];全国第八届中西医结合风湿病学术会议论文汇编[C];2010年
8 仉慧敏;孙淑华;胡晓燕;王艳蓉;孟金萍;刘云波;;无菌大鼠血液学及血液生化指标正常参考值的测定[A];第九届中国实验动物科学年会(2010新疆)论文集[C];2010年
9 王英春;;高尿酸血症与高血压、高脂血症、糖尿病的相关性探讨[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
10 顾伟根;;高尿酸血症与代谢综合征及其组分的关系[A];中国康复医学会第22届疗养康复学术会议论文汇编[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李源杰;尿酸和血管内皮功能障碍相关研究[D];北京协和医学院;2009年
2 刘琳;肾脏管球反馈在高尿酸诱导高血压发病中可能的机制[D];北京协和医学院;2013年
3 张淳;PEG修饰人犬嵌合尿酸酶结构功能研究及临床前药理学评价[D];华东理工大学;2012年
4 陈海霞;尿酸对血管内皮细胞氧化应激反应的影响及其对细胞的损伤作用[D];中南大学;2012年
5 邹贵勉;社区和临床高尿酸血症及其相关疾病系列研究[D];南方医科大学;2011年
6 刘志刚;泄浊除痹方治疗高尿酸血症物质基础研究[D];广州中医药大学;2011年
7 苗蕾;炎症因子及脂肪因子与高尿酸血症的关系及民族异质性研究[D];新疆医科大学;2012年
8 黎创;名中医治疗高尿酸血症的处方挖掘及临床验证[D];广州中医药大学;2010年
9 王占奎;清泻浊毒法对实验性高尿酸血症和急性痛风性关节炎的影响及机理研究[D];山东中医药大学;2010年
10 常宏;三聚氰胺致婴幼儿泌尿系结石的实验研究[D];兰州大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孙晓军;mPEG修饰对产朊假丝酵母与一种未鉴定念珠菌尿酸酶的影响[D];重庆医科大学;2010年
2 张纯;尿酸酶的聚乙二醇修饰及其成药性的初步评价[D];重庆医科大学;2011年
3 彭建春;人血浆中尿酸及嘌呤物质的含量测定[D];重庆医科大学;2012年
4 袁国军;别嘌呤醇对尿酸诱导的平滑肌细胞赖氨酰氧化酶表达的影响[D];遵义医学院;2013年
5 王冬梅;尿酸对血管内皮功能影响的相关研究[D];北京协和医学院;2011年
6 陈远翔;重组苛求芽孢杆菌尿酸酶诊断性能评估[D];重庆理工大学;2012年
7 邬丹;尿酸与2型糖尿病代谢紊乱及危险因素分析[D];南方医科大学;2011年
8 陈升凯;猪—人尿酸酶的纯化与PEG化修饰研究[D];长江大学;2013年
9 范俊平;高尿酸诱导大鼠高血压发病机制的研究[D];北京协和医学院;2011年
10 马亚;尿酸与血管内皮损伤的基础与临床研究[D];北京协和医学院;2012年
中国重要报纸全文数据库 前3条
1 杜朋;易混淆的常用西药名[N];医药养生保健报;2005年
2 北京大学第三医院风湿免疫科 郑晓娟 刘湘源;应对痛风 不同时期策略不同[N];健康报;2011年
3 第二军医大学长海医院风湿免疫科主任 赵东宝 整理 朱奎 邱志涛;痛风患者无需零嘌呤饮食[N];健康报;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978