急性出血坏死性胰腺炎肺损伤发病机制及中药治疗的实验研究

【摘要】：目的 急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)时血中增多的磷脂酶A_2(PLA_2)对Ⅱ型肺泡上皮细胞的损伤作用是引起胰腺炎肺损伤的重要因素。本研究对大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞进行分离纯化和原代培养，并在体外研究了PLA_2及含有PLA_2的AHNP大鼠血清对培养细胞的损伤作用及机理。方法 对大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞进行分离纯化和原代培养，分别加入PLA_2及含有PLA_2的AHNP大鼠血清，并设PLA_2抑制剂(盐酸阿的平)对照组，各组均孵育4h，离心收集细胞，破碎细胞核提取核蛋白，ELISA法测定NF-κB活性；测定培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性，另外对培养细胞进行透射电镜检查，观察PLA_2对肺泡Ⅱ型上皮细胞的损伤作用。结果PLA_2及含有PLA_2的AHNP大鼠血清可使Ⅱ型肺泡上皮细胞培养上清液中LDH活性显著升高、Ⅱ型肺泡上皮细胞NF-κB活性显著增高，透射电镜检查显示Ⅱ型肺泡上皮细胞受损严重。盐酸阿的平可显著抑制PLA_2对Ⅱ型肺泡上皮细胞的损伤作用。结论 AHNP时，PLA_2对Ⅱ型肺泡上皮细胞的损伤作用是造成胰腺炎肺损伤的重要因素；这种损伤作用除了与其对Ⅱ型肺泡上皮细胞的直接损伤作用有关外，还与其激活NF-κB的表达有关。