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胰岛素抵抗血压升高机制的实验研究

曹路  
【摘要】:内皮功能障碍在胰岛素抵抗状态下高血压的发病机制中有重要作用。胰岛素对于维持血管内皮细胞的正常功能至关重要,在胰岛素抵抗状态下甚至在还未发生临床表现的初期,就已普遍存在内皮功能障碍。因此,本文将从动物试验、细胞培养两个方面通过对内皮功能及胰岛素磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)信号转导途径的研究来探讨胰岛素抵抗状态下血压升高的机制。 目的:(1)探讨胰岛素抵抗大鼠血压升高的机制;(2)研究高糖、N~G-硝基-左旋-精氨酸-甲基酯(L-NAME)及肾素—血管紧张素系统(RAS)对一氧化氮、超氧阴离子的影响以及与血压升高的关系;(3)观察BH_4、L-精氨酸和局部血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)生成对内皮细胞产生超氧阴离子的作用以探讨它们对内皮功能的影响;(4)探讨胰岛素/PI3-K/Akt/内皮型一氧化氮合成酶途径对NO生成的影响。 方法:在动物试验部分,通过给予高糖饮食、L-NAME喂养及高糖饮食加L-NAME建立不同的胰岛素抵抗大鼠模型,并制造链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠模型,观察大鼠血压、心率及血清eNOS、NO、SOD、O_2~-和血浆血管紧张素Ⅱ的变化;建立肾动脉狭窄的2K1C肾血管性高血压大鼠模型和高糖饮食、L-NAME喂养诱导的胰岛素抵抗大鼠模型,观察血压、心率及血清eNOS、NO、SOD、O_2~-和血浆血管紧张素Ⅱ的变化。在细胞培养部分,检测四氢生物喋呤(BH_4)、L-精氨酸(L-Arg)、血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)和厄贝沙坦(Irb),对内皮细胞生成血管紧张素Ⅱ、NO、O_2~-的影响;检测胰岛素、葡萄糖、L-NAME(NOS的竞争性抑制剂)以及Wortmannin(PI3-K活性不可逆的抑制剂)对培养的人脐静脉内皮细胞PI3-K表达以及NO、O_2~-产生的影响。 结果:实验前后,各组大鼠间心率无明显差异(P0.05)。实验前各组血压无差异(P0.05),而实验四周时,高糖组、L-NAME组、L-NAME加高糖组(4周)和L-NAME加高糖组(16周)4个胰岛素抵抗大鼠模型以及STZ组血压均明显高于对照组(P均0.01),L-NAME加高糖组(16周)血压高


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