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CIK细胞治疗恶性实体瘤的临床前研究

岳欣  
【摘要】:第一部分 CIK细胞的制备及基本特征 目的:CIK细胞是一种新型的应用于过继免疫治疗的免疫活性细胞,本研究旨在建立包含多细胞因子的培养体系体外扩增外周血单个核细胞制备CIK细胞,进而通过检测CIK细胞的表型特点、多种细胞因子的分泌和对于胃癌细胞和结肠癌细胞的杀伤活性以探讨其应用于抗肿瘤治疗的可能。 材料和方法: 1.CIK细胞的体外制备:采集人外周血单个核细胞,按特定的次序加入CD3McAb、IL-2、IFN-γ、IL-1α等多种细胞因子,每3日更换新鲜培养液并补充IL-2和IFN-γ,经过12~14天的体外培养收获CIK细胞,并检测其增殖概况和细胞活率。 2.CIK细胞的表型特征和细胞因子的分泌:以流式细胞技术对CIK细胞进行表型特征分析,用ELISA方法检测CIK细胞分泌的IL-2、IFN-γ和IL-10等细胞因子。 3.CIK细胞对肿瘤的细胞毒活性:以胃癌细胞系(823细胞)和结肠癌细胞系(HCT-8细胞)为靶细胞,用LDH法检测CIK细胞对肿瘤细胞的细胞毒活性。 结果: 1.经过体外培养,细胞总数扩增为初始细胞数目的49.8倍,活细胞率比例在95%以上。 2.经过多种细胞因子的诱导,CIK细胞的CD3、CD3/CD8、CD3/CD4、


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