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大黄素影响大鼠胃平滑肌细胞钙敏感性调节机制的研究

吴斌  
【摘要】:背景:目前的研究表明平滑肌细胞的收缩机制为:①细胞内[Ca~(++)]i升高后,通过肌球蛋白轻链激酶(MLCK)途径磷酸化肌球蛋白轻链(MLC_(20))引发平滑肌收缩。②钙敏感性的升高,这一机制是通过抑制肌球蛋白轻链磷酸酶(MLCP)的活性来实现的。钙敏感性的增加使得在相同[Ca~(++)]i浓度条件下,细胞可以产生更大的收缩力。调节钙敏感性的信号转导途径被认为是:激动剂通过G蛋白偶联受体激活RhoA(一种22-26-kDa的小GTPase),随之激活其下游的ROK激酶(RhoA kinase),磷酸化MLCP的调节亚单位,从而抑制MLCP的活性抑制MLC_(20)脱磷酸化。国外对钙敏感性的研究已很多,并且机制已明确,但大黄素对大鼠胃肠平滑肌细胞G蛋白偶联的钙敏感性调节是否影响国内外尚无报道。 目的:研究大黄素对G蛋白偶联的钙敏感性调节影响的机制。 方法:用酶分解法分离Wistar大鼠胃平滑肌细胞。采用平滑肌细胞内钙钳制技术使平滑肌细胞内的游离钙离子水平控制在某一特定水平。先观察大黄素是否通过G蛋白偶联发挥作用,将实验分四组:①大黄素组;②大黄素+GDP类似物GDPBs组;③GDP类似物GDPβs组;④正常对照组。各组均分五个浓度梯度,大黄


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