臂丛神经根撕脱回植后应用神经干细胞的实验研究

【摘要】： 目的: 探讨臂丛根性撕脱伤后,神经干细胞脊髓内移植对前角运动神经元的挽救效应,并探讨其作用机制,观察神经干细胞在脊髓内的存活和分化。观察回植后的神经根的生长情况。 方法: 1.选取孕龄15～18天的Wistar大鼠5只,取胎鼠脑组织,分离培养神经干细胞,在体外培养、扩增,并在移植前一天用5溴-2脱氧尿苷(BrdU)标记。 2.选成年SD大鼠60只,雌雄各半,5%氯氨酮(300～350mg/kg)腹腔注射麻醉后,进行颈4～颈7椎板减压,于椎管内硬脊膜外撕脱颈5～颈6神经根,将颈6神经前根回植入脊髓前角,用11-0无创伤线缝合2针,后根旷置,颈5神经根埋入肌肉。然后用微量进样器将神经干细胞移植于颈6脊髓节段的脊髓前角附近。 3.于术后2、4、6、8、12、24周取脊髓标本,作HE染色,免疫组织化学染色,凋亡染色。观察脊髓前角细胞的形态学和数量的变化,神经干细胞的存活和分化情况。 结果: 1.术后57只大鼠存活,3只死亡。,所有大鼠均表现为单侧上肢瘫痪,双下肢和对侧上肢无影响。 2.臂丛神经根性撕脱回植伤后各时间点脊髓横断面HE染色显示:神经根撕脱侧运动神经元胞体萎缩,部分运动神经元水肿,运动神经元数目明显减少,到术后24周时,对照组运动神经元减少达84.3%,实验组63.7%。并且各时间点实验组运动神经元存活率均高于对照组。 3.免疫组织化学染色显示:实验组损伤侧脊髓前角内可见散在的染色呈棕黄色的神经干细胞,仍保持未分化的形态学特征。 4.Tunel凋亡染色显示:实验组阳性神经元较对照组损伤侧明显减小 结论: 1.臂丛神经根性撕脱伤后,脊髓前角运动神经元将发生变性死亡,并随着时间而逐渐加重。 2.臂丛神经根性撕脱伤后,前角运动神经元的变性死亡属于凋亡。 3.神经干细胞在移植入臂丛根性撕脱回植伤的脊髓后能存活,并能明显减少神经根撕脱伤后前角运动神经元的凋亡。