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功能矫形对青春期大鼠浅层嚼肌细胞凋亡的影响及其调控机制

杜衍晓  
【摘要】:目的:功能矫形通过矫治器持续牵张咀嚼肌及口周肌,使其产生的收缩力传递到牙、牙周膜、颌骨等部位,促进软硬组织发生适应性改建,重建新的功能形态平衡。其中,浅层嚼肌是参与咀嚼和功能矫形治疗的主要肌肉,功能矫形治疗中前伸下颌及打开咬合均与浅层嚼肌的功能状态有关。故浅层嚼肌细胞在肌收缩力的调控下发生的适应性改建在功能矫治以及疗效的维持和稳定中起着重要作用。本研究以青春期Sprague-Dawley(SD)雄性大白鼠通为研究对象,在成功构建功能矫形前伸下颌模型的基础上,对大鼠戴用不同时间的的矫治器,取浅层嚼肌组织,应用不同的实验方法观察浅层嚼肌细胞凋亡的时机和变化规律,并检测浅层嚼肌细胞中NF-κB的表达及活性变化,探讨NF-kB、功能矫形和大鼠浅层嚼肌细胞凋亡三者之间的关系。为进一步丰富口腔生物力学的实验研究方法和阐明功能矫形治疗的分子机理提供理论依据。方法:构建功能矫形前伸大鼠下颌模型,对大鼠戴用不同时间的矫治器,在1d,7d,14d,21d,28d分别处死大鼠,取浅层嚼肌组织。采用RT-PCR法,Hoechst33258组织切片染色、TUNEL染色等观察细胞凋亡的时机和变化规律,同时检测NF-κB的活性。结果:Hoechst 33258细胞染色显示,对照组细胞核为弥散均匀的圆形或椭圆形荧光,实验组细胞核可见致密浓染的颗粒、新月体或环状荧光。TUNEL染色结果显示,凋亡细胞体积缩小,核固缩,边界清楚,细胞浆淡染,染色质呈特异的棕黄色着染,散在分布。RT-PCR显示,随着大鼠戴用矫治器时间的延长, Bcl-2和Bax基因的表达均增高,但Bcl-2基因的表达强度比Bax要弱。Bax/BcL-2比值随着大鼠戴用矫治器的时间延长而升高,至第3周到达顶峰,第4周开始降低,但仍高于对照组。免疫组化检测显示,NF-κB p65的表达随着大鼠戴用矫治时间的延长逐渐升高,至3周达到顶峰,第4周开始下降,但仍高于对照组。 结论:①ax/Bcl-2比值升高及NF-κB的激活可促进浅层嚼肌细胞的凋亡,参与了肌肉结构和功能的改建过程。②功能矫形可引起浅层嚼肌细胞凋亡,导致肌肉的结构和功能发生适应性改建。


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