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红霉素中枢拟胃动素作用及其诱导室旁核c-Fos蛋白表达

高志胜  
【摘要】: 胃动素是由小肠上段粘膜内分泌细胞分泌的22个氨基酸残基组成的活性多肽。其外周作用主要是调节消化间期胃肠移行性复合运动。早在20多年前人们就发现中枢神经系统内存在胃动素样免疫反应性。以后的一系列实验均表明中枢神经系统内有胃动素及其受体分布。对其在中枢的作用也进行了一些研究,初步证明胃动素可能有比较广泛的中枢调节作用,如:调节动物的摄食行为,神经调制作用,影响腺垂体激素的分泌,减轻动物焦虑样的情绪行为。近年,我们实验室研究重点在于中枢胃动素对胃运动的调节作用及其机制。已经发现在中枢多个部位微量注射胃动素具有促进清醒大鼠胃运动的作用。红霉素(EM)是胃动素受体激动剂,已有大量的研究证明外周应用红霉素具有胃动素样作用。但关于红霉素在中枢是否仍有胃动素样的生物作用呢?至今尚未见文献报道。 实验目的:探讨红霉素在中枢的拟胃动素作用及其可能的机制。 材料与方法:(1)清醒大鼠胃运动记录:用禁食15-20小时Wistar大鼠(n=32)单侧侧脑室埋置微量注射套管。在胃窦距幽门0.5cm浆膜层缝置应力传感器。侧脑室微量注射EM9.16nmol, 45.78nmol, 91.56nmol, EM91.56nmol+GM109 2.95nmol 观察胃运动变化。(2)c-Fos蛋白免疫组化染色:Wistar大鼠(n=12)侧脑室埋置微量注射套管,训练适应两周后分别给予EM45.78nmol,91.56nmol,EM91.56nmol+GM109 2.95nmol,另设一生理盐水对照组。4%多聚甲醛灌注取脑,行冰冻切片,c-Fos蛋白免疫组化染色,观察有关核WP=4团c-Fos蛋白的表达。 结果:(1)清醒大鼠胃运动的实验结果:侧脑室微量注射EM后胃运动幅度呈剂量依赖性增强。其中EM45.78nmol组胃运动幅度增强持续10分钟,EM91.56nmol组胃运动增强持续20分钟,EM9.16nmol组胃运动变化均无统计学差异。GM109可以部分阻断EM91.56nmol的促胃运动作用。各实验组的收缩频率与对照组相比均无显著性差异。(2)c-Fos蛋白免疫组化染色实验结果:经侧脑室注射EM45.78nmol,EM91.56nmol,可以诱导下丘脑室旁核神经元c-Fos蛋白的表达,具有剂量依赖性。GM109 2.95nmol可以部分阻断EM91.56nmol诱导的下丘脑室旁核c-Fos蛋白的表达。在生理盐水组只有极低水平的c-Fos的表达。 结论:(1)EM侧脑室注射具有胃动素样的促进胃运动的作用,这种作用可能是通过中枢胃动素受体介导的。(2)EM诱导下丘脑室旁核神经元c-Fos蛋白的表达,这种作用可为GM109部分阻断,提示下丘脑室旁核可能是EM发挥中枢作用的作用部位之一。


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