三氧化二砷对615系小鼠移植性胃癌的抗癌作用及机制研究

【摘要】： 目的：胃癌是我国常见恶性肿瘤之一，其早期诊断率低，中晚期尚缺乏有效治疗手段。三氧化二砷(As_2O_3)对人胃癌细胞株的体外生长有较好抑制作用，但目前尚无对体内实体肿瘤的作用报道。本实验以MFC(小鼠前胃癌细胞株)在近交系615系小鼠体内复制实体胃癌模型，用不同剂量砷剂腹腔灌注，观察其抑瘤作用，并初步从不同角度探讨其诱导凋亡的机理。 方法：将MFC胃癌细胞(3×10~6)种植于近交系615系传代鼠右腋部皮下，建立移植性胃癌模型。40只鼠随机分为5组，从种植24小时后，分别腹腔内注射5—FU10 mg．kg~(-1)．d~(-1)，As_2O_3 1 mg．kg~(-1)．d~(-1)，2 mg．kg~(-1)．d~(-1)，4 mg．kg~(-1)．d~(-1)，等体积生理盐水，每日1次，共8天，观察成瘤情况；第9天处死荷瘤鼠，并解剖取瘤称重，观察抑瘤率；取标本分别在光镜下观察组织形态学变化；流式细胞仪(FCM)观察对凋亡率影响；透射电镜观察凋亡细胞超微结构变化；免疫组化半定量分析凋亡调控基因Bcl-2，Bax相关蛋白的表达情况。 结果：1．全部小鼠均成功生长实体型皮下移植瘤。2．As_2O_3对移植瘤生长有明显抑制作用，以2mg．kg~(-1)．d~(-1)组明显，抑瘤率为54.59％，与5-FU组对比(抑瘤率为42.71％)，P＜0.01，差别有显著统计学意义。3．光镜下大剂量4mg．kg~(-1)．d~(-1)As_2O_3组小鼠胃癌组织有坏死表现，且引发炎症反应，其余组少见。4．透射电镜下砷剂及5-FU组瘤细胞均有凋亡超微结构改变，如细胞皱缩，胞膜完整，染色质呈新月状边聚或呈团块状，凋亡小体形成等，尤以砷剂2mg．kg~(-1)．d~(-1)组典型。5．FCM显示砷剂组及5-FU组均有凋亡峰“亚G1峰”出现，且以砷剂2mg．kg~(-1)．d~(-1)组明显，凋亡率最高，为21.11％，与阳性对照5-FU组(15.51％)比较，P＜0.01，差别有显统计学意义。6．免疫组化示组织中Bcl-2蛋白阳性细胞数在砷剂作用下降低，Bax蛋白阳性细胞数则上升。 结论：1．As_2O_3对荷胃癌鼠皮下移植瘤生长有明显抑制作用，可诱导胃癌细胞 中文摘要 凋亡。2.砷剂诱导肿瘤细胞凋亡存在最适剂量，以2 mg.kg一，.d一，组作用明显，且 效果优于传统化疗药5一FU。3.大剂量4mg.kg一’.d一’组可能导致细胞毒杀伤作用， 引起肿瘤组织坏死。4.诱导凋亡的分子生物学机制可能为下调凋亡抑制基因 Bcl一2的表达，上调凋亡活性基因Bax表达。5.As办，可能是临床胃癌化疗新的 有效药物，值得进一步探讨。