饥饿和糖尿病对大鼠不同脑区胃动素及生长抑素免疫阳性神经元的影响

【摘要】： 背景资料：胃动素(Motilin,MT)是由22个氨基酸组成的脑肠肽，由小肠粘膜上部的内分泌细胞分泌，在消化间期呈周期性释放。其在外周的功能主要为刺激胃肠道收缩、运动及诱发胃肠道(Migrating．Motor．Complox MMC)消化间期的移行性运动的Ⅲ相收缩运动。胃动素不仅广泛存在于胃、十二指肠等外周器官中，在中枢神经系统中如：小脑、大脑皮层、杏仁核、下丘脑、垂体、松果体及海马均有胃动素及其受体分布。静脉(iv)及侧脑室内(icv)微量注射胃动素都可增强大鼠和小鼠的胃运动及摄食活动。此外，胃动素还有影响腺垂体激素的分泌，减轻动物焦虑样的情绪行为等作用。 生长抑素(Somatostatin，SS)含有14个氨基酸的脑肠肽，广泛的分布于中枢和外周，除了具有调节生长激素的分泌，还有调节胰岛的功能，抑制细胞的增殖，在整体和离体灌流情况下抑制胃肠运动，但在中枢注射生长抑素却有促进胃运动的作用。 临床发现糖尿病常伴有以胃运动减弱为特征的胃轻瘫(Diabetic Gastroparasis Mellitus)，患者的血浆中胃动素和生长抑素水平升高，应用MT或MT受体激动剂-红霉素可改善胃轻瘫的症状，但是，对于中枢胃动素与生长抑素对胃运动及摄食的调控作用尚未明了。 目的：研究大鼠脑区内胃动素及生长抑素免疫活性神经元表达的特点；在饥饿和糖尿病条件下表达发生变化极其意义；二者在胃肠功能调控中的作用。 中文摘要 材料和方法: (l)糖尿病大鼠模型的制备:实验采用雄性大鼠(Sprague一Dawley，体重250一 3009，n=40)，腹腔给予25%四氧嚓吮(Alloxan，用0.9%的NaCI溶液稀释，120mg /kg)，间隔24小时后再给予同样剂量的四氧喀睫。 (2)记录并观察注射四氧嗜咙后大鼠的体重、一进食量、饮水量、尿量、血糖、尿 糖等各项指标。 (3)免疫组化法:实验组分为正常饮食组、饥俄组和糖尿病组，观察各组大鼠脑 区内(海马、下丘脑)MT及55活性细胞表达情况及分布特点。 结果: 1糖尿病模型大鼠制备情况: 成模后的大鼠进食量、饮水量、尿量、血糖、尿糖等各项指标与成模前的 各项比较，都有所增加。成模的标准为注射四氧啼咤后，(1)尿糖，一个‘+’号 以上。(2)空腹血糖)13.6mmol几，持续10天以上。 2免疫组化实验结果: 2.1正常饮食组(对照组)大鼠脑区内MT免疫反应(IR)细胞及55免疫反 应(IR)细胞的表达: 对照组大鼠的海马(Hip)、室旁核(PvN)、视上核(soN)、室周核(Pe)、弓 状核(ARC)、正中隆起(ME)可见MT-IR及55一IR细胞的表达; 2.2饥饿和糖尿病时大鼠脑区内MT-IR及55一IR细胞的表达: (1)MT-IR细胞的表达: 饥饿和糖尿病时室旁核(PVN)、视上核(SON)、MT-IR细胞表达信号强 于对照组。其中MT-IR细胞在室旁核(PVN)增加最为明显，与对照组相比饥 饿和糖尿病组分别增加了8倍和12倍，统计学有显著意义(P0.001);饥饿时 MT-IR细胞在视上核和海马分别增加了1 .6倍和0.2倍，经统计学分析有意义 P0.05;糖尿病时视上核MT-IR细胞增加了1 .5倍P0.05，海马MT-IR细胞在 糖尿病时与对照组相比差别无显著性(P0.05)。 (2) 55一IR细胞的表达: 饥饿和糖尿病时室旁核(P vN)，海马(Hip)55表达信号强于对照组大鼠。 中文摘要 室旁核(P vN)中55一IR细胞增加最为显著，与对照组相比，饥饿和糖尿病组分别 增加6.3倍和5.7倍(P0.001);55一IR细胞在海马中，与对照组相比饥饿和 糖尿病组分别增加0.62倍和1 .07倍(P0.05)有统计学意义。 2.3 MT和55免疫活性细胞在同一核团内的存在: 免疫组化邻片染色发现，MT和55免疫活性细胞共存于海马(HIP)，正中 隆起(ME)和室旁核(PVN)核团内。从糖尿病组动物海马邻片染色发现，MT及SS 阳性细胞在齿状回、CA3、CA4区的颗粒细胞层和锥体细胞层都有表达。 结论:饥饿及糖尿病时，胃动素(MT)及生长抑素(55)免疫活性 细胞在海马和下丘脑室旁核内表达增强，提示中枢胃动素(MT)及生长抑素(SS) 可能参与由海马一下丘脑室旁核一杏仁核一延髓DVC(迷走神经复合体)一迷 走神经这一环路实现对胃运动及摄食的调节作用。