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全反式维甲酸对培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞增生及CyclinE, P21表达的影响

张卫国  
【摘要】: 目的 探讨全反式维甲酸对培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增生及CyclinE,P21表达的影响,观察全反式维甲酸(ATRA)抑制血管平滑肌细胞增生的作用。 方法 应用胶原酶法进行大鼠主动脉平滑肌细胞原代培养;胰蛋白酶对贴壁平滑肌细胞进行消化传代后,将汇合的血管平滑肌细胞以1×10~5个细胞/升浓度接种于24孔培养板,37℃,5%CO2条件下培养.贴壁24h后换无血清DHEM培养液培养24h,使细胞统一至G_0期。按如下分组加入刺激因素培养24h:①对照组(n=5),继续培养,不加干预因素。②胎牛血清(FBS)组(n=5),加入20%FBS。③ATRA组(n=5),加入20%FBS与2.5×10~(-6)mol/l的ATRA。作用24h。~3H-TdR掺入法检测ATRA对大鼠主动脉血管平滑肌细胞DNA合成过程的影响,并运用免疫印迹杂交技术(Western-Blotting法)观察ATRA对VSMC细胞周期素E蛋白(CyclinE)和细胞周期素依赖性激酶抑制物P21蛋白(P21)表达的影响.所有实验数据以均数±标准差(x±s)表示,组间差异性比较采用方差分析和t检验。 结果 ①ATRA组表征血管平滑肌细胞DNA合成量的~3H-TdR掺入率较FBS组明显减少(3725.48±643.77 vs 11567.09±1974.67,P<0.01)。②ATRA组表征CyclinE蛋白表达的凝胶灰度值较FBS组明显减少(122.48±3.53 vs 142.93±10.57,P<0.05)。③ATRA组表征P21蛋白表达的凝胶灰度值较FBS组明显增加(151.40±9.98 vs 56.33±11.06,P<0.001)。 结论 ①ATRA具有通过减少VSMC DNA合成、抑制CyclinE表达、促进P21蛋白表达抑制VSMC增生的作用。②提示ATRA抑制VSMC增生的作用可能与其抑制CyclinE蛋白及促进P21蛋白的表达有关。③推测ATRA具有抗动脉粥样硬化、预 中文摘要 防PTCA、5 t ent术后再狭窄的作用。


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