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液氮保存山羊胎仔同种异体血管移植后的免疫学研究

王涛  
【摘要】:目的 近年来新生儿婴幼儿心脏外科的飞速发展对寻找合适的血管和瓣膜替代物提出了迫切要求。本实验旨在通过动物实验,为建立大月龄胎儿血管和瓣膜组织库提供动物学研究的理论基础。 方法 取怀孕山羊(胎龄3~4月)10只,月龄在2~3月的幼羊17只。无菌条件下取出胎羊,并将胎羊主动脉取出、修剪,热缺血时间均在半小时之内。共取得胎羊主动脉20根。分为三组:一组为新鲜组(8根),取出的主动脉直接植入幼羊外周动脉(股动脉);一组为冷冻组(8根),取出的主动脉依次用冷冻保护液1号液和冷冻保护液2号液浸泡,后放置于4℃冰箱冷平衡,特制无菌冷冻袋包装,用液氮蒸气梯度降温方法完成降温,-196℃保存1个月后,迅速温水复温后植入幼羊外周动脉(股动脉);对照组为未移植组;分别在1个月、4个月取出移植的血管,利用免疫组织化学的方法测定血管组织中的IgG,初步评估新鲜组和冷冻组移植前后的免疫学变化。 结果 17只幼羊进行了血管移植,其中存活16只,存活率94%。分别对新鲜组和冷冻组移植血管进行免疫组化检测,显示IgG主要沉积于血管中膜,为胞浆染色。其中两组移植1个月后、4个月后的结果与对照组相比均有统计学意义。移植1个月后两组之间相比有统计学意义,而移植4个月之后相比则没有统计学意义。新鲜组移植1个月与4个月相比有统计学意义,冷冻组移植1个月与4个月相比没有统计学意义。 结论 由于山羊胎仔主动脉及幼羊股动脉较粗,因此,以山羊进行同种异体血管移植的成活率较高。经冷冻后的血管仍然保持着免疫原性,但低于未经冷冻处理直接移植。免疫原性会随着时间的延长有下降趋势。


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