收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

VEGF121和VEGF165对血管内皮细胞通透性影响的研究

高磊  
【摘要】:目的:血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor ,VEGF)发现于1989年,是一种能特异的作用于血管内皮细胞的生长因子,具有促血管生成等活性。血管内皮细胞生长因子(VEGF)家族成员包括: VEGF-A、VEGF-B、胎盘生长因( PIGF)、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、VEGF-F和它们的受体VEGFR-1、2、3及Neuropilins,VEGF受体特异性地分布于血管内皮等细胞,VEGF通过与其受体的结合而发挥促进血管新生和增强血管通透性的生理功能。在人类,VEGF-A占主导作用,其共有8种亚型,包括:VEGF121, VEGF145, VEGF148,VEGF165, VEGF165b,VEGF 183,VEGF 189和VEGF206,其中VEGF 121和VEGF 165是主要的分泌亚型。 一氧化氮(Nitric oxide,NO)广泛分布于动物和植物的体内,具有多种的生理病理学功能,是作用最强的舒血管物质之一。NO作为信号传导因子与鸟苷酸环化酶结合,使之活化,cGMP含量升高,cGMP可降低血管平滑肌中的Ca~(2+)的浓度,引起血管平滑肌舒张,血管扩张、血管通透新增加。 血管新生(Angiogenesis)及通透性增加在肿瘤、风湿性关节炎、心血管疾病、糖尿病并发症等疾病发生、发展中起着重要作用,而血管新生与VEGF有着密切的关系。近年研究发现,在诸多皮肤病如特应性皮炎、银屑病、尖锐湿疣等的皮损和血清中VEGF水平均高于正常,所以认为其与这些皮肤病的发生发展密切相关,因此,研究血管内皮生长因子在皮肤病的表达及其在病理过程中所发挥的作用,不仅有助于阐明诸多皮肤病的发病机制,而且可通过对其作用靶点的研究,将为今后进一步探讨其治疗措施提供新的思路。 VEGF121和VEGF165是皮肤组织主要的表达亚型,两者参与各种病理生理过程,以往的各种研究主要着眼于VEGF-A的研究,具体到亚型的很少,所以,本研究旨在通过研究两种不同亚型的VEGF对血管内皮细胞通透性影响,以及不同亚型VEGF刺激血管内皮细胞后NO释放量的测定,明确引起血管通透性增加的主要VEGF亚型,从而为研发VEGF阻断剂,靶向治疗存在VEGF异常表达的皮肤病提供可靠的理论依据,同时可将毒副作用降到最低。 方法: 1人类脐静脉内皮细胞(HUVEC)的体外培养EGM-2完全培养基37℃、5% CO_2培养箱静置培养,2-3天更换一次培养基。 2双腔通透性测定试剂盒(In Vitro Vascular Permeability Assay kit;ECM640)建立通透性检测模型,浓度为25ng/ml的VEGF121或VEGF165刺激人类脐静脉内皮细胞。 3荧光酶标仪(Exmission: 490 nm, Emission: 520 nm)测定底层培养基中不同时间FITC-dextran量的变化。 4人类脐静脉内皮细胞的体外培养,浓度为25ng/ml的VEGF121或VEGF165刺激人类脐静脉内皮细胞,Griess法测定不同时间培养基中NO含量。 5制图,运用统计学软件SPSS13.0对实验数据进行统计分析。 结果: 1经VEGF165或VEGF121刺激人类脐静脉内皮细胞,通透性物质(FITC-dextran)测定 1.1荧光酶标仪测定不同刺激时相的通透性物质(FITC-dextran)的量,应用重复测量的方差分析,在不同刺激物之间培养基中FITC-dextran的量有明显的差异,p0.05,即经VEGF121处理的血管内皮细胞,渗透到细胞层外的FITC-dextran显著多于VEGF165和空白对照组。说明VEGF121对细胞通透性影响较VEGF165显著。 1.2在不同刺激时相之间通透性物质有明显的差异,p0.05,即随着刺激时间的增加,渗透到细胞层外的通透性物质(FITC-dextran)也明显增加。 1.3刺激时间和不同刺激物之间存在交互作用,p0.05。 2经VEGF165或VEGF121刺激人类脐静脉内皮细胞,培养基中NO产量的测定 2.1 Griess试剂盒测定培养基中NO含量,应用重复测量的方差分析,在不同刺激物之间NO产量有明显的差异,p0.05,即经VEGF121处理的血管内皮细胞,分泌的NO显著多于VEGF165和空白对照组。VEGF121对细胞NO产量的影响较VEGF165显著。 2.2在不同刺激时相之间分泌的NO的量有明显的差异,p0.05,即随着刺激时间的增加,分泌的NO也明显增加。 2.3刺激时间和不同刺激物之间存在交互作用,p0.05。 结论: VEGF121和VEGF165均能够引起血管内皮细胞通透性增加,刺激内皮细胞产生NO。但是,VEGF121对通透性的影响远高于VEGF165,VEGF121刺激血管内皮细胞所产生的NO含量高于VEGF165,VEGF121可能是导致血管通透性增加的主要血管内皮生长因子亚型。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 唐浩,陈勇,夏昆,文娟,卿志荣,赵天力,杨进福,胡冬煦;VEGF_(165)在哺乳动物细胞中的稳定表达[J];中国医师杂志;2004年07期
2 刘日光,尹培荣,杨述华,向阳,杨操,易诚青,刘建湘;人VEGF_(165)基因在狗骨髓基质细胞中的表达[J];中国矫形外科杂志;2004年19期
3 钱虎声,张柏根;阳离子脂质体介导转染高表达载体pAdCMV-VEGF_(165)的实验研究[J];中国现代普通外科进展;1999年04期
4 傅云峰,谢幸,叶大风,陈怀增,吕卫国;卵巢上皮性癌血管内皮生长因子mRNA异构体表达[J];浙江大学学报(医学版);2002年01期
5 陈劲龙,冉丕鑫;血管内皮生长因子及其受体KDR在成熟期大鼠肺内的表达[J];广州医学院学报;2003年04期
6 李学雷,赵劲秋,欧阳仁荣;VEGF在恶性血液肿瘤中的作用及机制研究进展[J];白血病.淋巴瘤;2004年04期
7 朱明娟,夏宏器;血管生成、调节及临床[J];中国心血管杂志;2000年04期
8 汪姗姗;血管新生与冠心病[J];心血管病学进展;2002年02期
9 刘冰,祁雅慧;VEGF治疗心肌缺血的研究进展[J];中国生物工程杂志;2003年07期
10 顾松,刘长建,孙雪梅,张乐,陈蕾蕾;脂质体介导的VEGF_(165)基因转染对内皮细胞生长的作用[J];现代免疫学;2004年03期
11 ;大手术后只出现血清血管内皮生长因子暂时性增多[J];国外医学.外科学分册;2000年05期
12 齐政,宋妍,糜若然;血管生成与卵巢癌[J];天津医科大学学报;2000年02期
13 蔡振鑫;胃癌病人中的血管内皮生长因子值[J];国外医学.外科学分册;2003年01期
14 叶建红,李育红,宁亚功;血管内皮生长因子的临床应用展望[J];云南医药;2004年04期
15 夏圣;血管内皮细胞生长因子的研究进展[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;1997年04期
16 陈建国;血管内皮生长因子与心肌缺血[J];国外医学.生理.病理科学与临床分册;1999年02期
17 刘都户,张学庸,黄裕新,樊代明;VEGF_(165)反义RNA表达对人胃癌细胞恶性生物学行为的影响[J];第四军医大学学报;2001年09期
18 辛林,彭洪云;大肠癌PDGF和VEGF基因mRNA的表达研究[J];大肠肛门病外科杂志;2002年01期
19 徐丹,孟凡义,易正山;血管内皮细胞生长因子影响难治性急性髓系白血病发生发展的作用研究[J];癌症;2003年08期
20 谷仲平,王云杰,周勇安,刘锟,程庆书,李谨革,白雪帆;VEGF165反义RNA对人食管鳞癌细胞影响的实验研究[J];细胞与分子免疫学杂志;2004年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 施娅雪;王振峰;张皓;张柏根;;支架携带pSV-VEGF_(165)基因抑制内膜增殖的实验研究[A];中国中西医结合学会周围血管疾病专业委员会第六届换届暨学术交流会论文集[C];2004年
2 赵忠芳;吕仁荣;霍然;傅洪滨;徐广琪;;普萘洛尔治疗增生期血管瘤患儿血清中VEGF、MMP-9的变化[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年
3 徐勇;黄仁魏;王东宁;林桂真;林东军;何易;李旭东;林曲;;急性白血病血管内皮生长因子(VEGF)和受体的表达及其临床意义研究[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年
4 李飞;李树清;;VEGF表达在局灶性脑缺血后亚低温脑保护中的作用研究[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年
5 赵忠芳;吕仁荣;霍然;傅洪滨;徐广琪;;普萘洛尔治疗增生期血管瘤患儿血清中VEGF、MMP-9的变化[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年
6 杜娟;王景美;钱晓萍;刘宝瑞;;COX-2和VEGF在胃癌中的表达和意义[A];中华医学会肿瘤学分会第七届全国中青年肿瘤学术会议——中华医学会肿瘤学分会“中华肿瘤 明日之星”大型评选活动暨中青年委员全国遴选论文汇编[C];2011年
7 田翀;彭晓琳;张嫦慧;唐玉涵;任玮叶;孙秀发;郝丽萍;应晨江;;VEGF在白藜芦醇缓解内皮细胞高通透性的作用[A];营养与慢性病——中国营养学会第七届理事会青年工作委员会第一次学术交流会议论文集[C];2010年
8 陈西华;;小鼠月经模型中Hif-1α对VEGF调节作用的研究[A];中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集[C];2010年
9 梁国刚;;TGF-β1和VEGF在大肠癌中的表达及临床意义[A];第八届全国中西医结合普通外科临床与基础学术会议暨全国中西医结合外科危重病学习班论文汇编[C];2003年
10 廖圣恺;;5-LOX、CD-34、VEGF在涎腺黏液表皮样癌中的表达及意义[A];第八次全国口腔颌面—头颈肿瘤会议论文汇编[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张国鹏;两种核素报告基因系统用于监测治疗基因VEGF165表达的基础研究[D];华中科技大学;2010年
2 费嘉;VEGF mRNA反义核酸对白血病细胞药物敏感性的影响[D];暨南大学;2003年
3 赵薇;细胞因子GM-CSF、VEGF对大鼠内皮祖细胞功能活性的影响及其信号转导途径的体外研究[D];中国医科大学;2008年
4 董宏伟;大肠癌形成过程中肿瘤血管生成与细胞凋亡的变化及VEGF和p53表达的意义[D];中国医科大学;2002年
5 彭湃;VEGF在慢性创面愈合中的作用及机理研究[D];第一军医大学;2004年
6 范海涛;Survivin与VEGF的检测及二者反义寡核苷酸对膀胱癌的治疗研究[D];吉林大学;2010年
7 杨秀鹏;Tryptase诱导AML骨髓基质细胞高表达VEGF及机制的研究[D];中国医科大学;2010年
8 叶琇锦;成人急性白血病患者骨髓血管新生及相关机理的实验研究和临床意义[D];浙江大学;2002年
9 张聚良;血管内皮生长因子变异体基因的构建、表达及表达产物体内诱导自身抗体产生的研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
10 申宝忠;GFP基因标记的移植瘤活体分子成像研究[D];天津医科大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孙洁;VEGF表达及微血管密度与三阴性乳腺癌及非三阴性乳腺癌临床病理特征的关系[D];广西医科大学;2010年
2 齐振平;非小细胞肺癌中VEGF及其受体Flt-1的表达及临床意义[D];大连医科大学;2010年
3 刘小兵;脑胶质瘤VEGF,bFGF,IGFBP-2在血浆和脑脊液的定量分析及意义[D];河北医科大学;2010年
4 高磊;VEGF121和VEGF165对血管内皮细胞通透性影响的研究[D];河北医科大学;2011年
5 张志学;肺腺癌中血管内皮生长因子及其受体的表达与血管生成及预后的关系[D];青岛大学;2001年
6 李磊;VEGF,MMP-2在胃癌中的表达及其与浸润和转移的关系[D];郑州大学;2002年
7 孙丹;Snail、VEGF、MMP-9在肝细胞肝癌中的表达及临床意义[D];山东大学;2010年
8 栾东风;锌对高糖条件下视网膜müller细胞分泌VEGF的影响[D];吉林大学;2010年
9 郭晓斌;在细胞三维立体培养模型中观察VEGF对H460细胞MMP-2表达的影响[D];兰州大学;2010年
10 刘冬梅;高糖环境下脂联素对人心肌细胞增殖及VEGF表达的影响[D];山西医科大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 由香港麦迪信医学出版有限公司供稿;VEGF“陷阱”有效抑制肿瘤[N];医药经济报;2002年
2 张中桥;VEGF对乳腺癌的生长起重要作用[N];中国医药报;2002年
3 新华社;VEGF有望成为预防动脉梗塞新药[N];中国医药报;2005年
4 王婷婷;肿瘤能否“饿死”[N];科技日报;2004年
5 文执 编译;抗癌新靶标 肿瘤内的血管[N];科技日报;2002年
6 王天堂;国产防腐新材料亮相[N];中国化工报;2002年
7 张中桥;纳米微囊载体具有基因治疗应用潜能[N];中国医药报;2004年
8 宏宇;治疗性血管生成显示应用潜力[N];中国医药报;2003年
9 徐峰;肿瘤与血管生成息息相关[N];医药经济报;2001年
10 蒲昭和;饮茶防癌的奥秘[N];中国医药报;2001年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978