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长脉冲1064 nm Nd:YAG激光治疗兔耳增生性瘢痕的实验研究

尹冬云  
【摘要】:目的:瘢痕增生期一般采取保守治疗,包括药物(皮质激素,抗肿瘤药物等)治疗,压迫疗法,硅凝胶霜/膜外用,放射治疗,激光治疗等,各种治疗方法均有一定的限制及副作用,而激光因其治疗效果明显、起效快、创伤小、副作用少,已成为增生性瘢痕的一线治疗方案。闪光灯泵脉冲染料激光临床治疗增生性瘢痕,已取得一定疗效,但由于波长短,容易被表皮吸收引起局部色素改变,穿透深度不够,治疗较厚的增生性瘢痕效果不理想。长脉冲1064nm Nd:YAG激光基于血管热损伤时间理论,缓和的加热血管,并且具有更深的组织穿透力,表皮吸收能量少,副作用小等优点。目前长脉冲1064nm Nd:YAG激光治疗皮肤血管性疾病已经取得了良好的疗效。根据其作用机制,推测长脉冲1064nm Nd:YAG激光也可以封闭瘢痕内血管,可能进一步抑制成纤维细胞增殖和胶原纤维增生,从而抑制瘢痕增生。本课题通过建立兔耳增生性瘢痕模型,评价长脉冲1064nm Nd:YAG激光对增生性瘢痕的治疗效果。 方法:选择清洁级新西兰白兔10只,雌雄各半,雌兔未孕,体重2.5-3.0Kg,速眠新和氯胺酮1:1等比例配制,按0.2 ml/kg肌肉注射麻醉。麻醉成功后,兔耳常规消毒后,于兔耳腹侧面,亚甲蓝划线标记4处1.5cm×1.5cm正方形,尽量避开可见血管,每两处间距大于1.5cm,11号尖刀沿标记线切开深达软骨膜,血管钳剥离全层皮肤,并去除软骨膜,创面裸露不予包扎。术后7天去除痂皮,25-28天约90%的创面形成粉红色、突出表面、质地较韧的瘢痕组织此为兔耳增生性瘢痕模型造模成功,将左侧和右侧兔耳增生性瘢痕块分为对照组和实验组,实验组应用长脉冲1064nm Nd:YAG激光照射,对照组未予治疗。激光治疗30天后观察实验组及对照组瘢痕的颜色、质地;彩色超声多普勒测量瘢痕厚度;瘢痕取材后置于10%中性福尔马林固定液固定,酒精逐级脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,制成4mm切片。HE、Masson和CD31免疫组化染色,对比研究长脉冲1064nm Nd:YAG激光对兔耳增生性瘢痕的微血管、成纤维细胞和胶原纤维的影响。统计实验组和对照组增生性瘢痕块厚度、成纤维细胞密度、微血管密度情况,数据用均数±标准差表示,采用SAS V8统计软件处理,两样本均数的t检验,以P0.05为差异有统计学意义。 结果:(1)大体观察结果实验组瘢痕变平,硬度、色泽较对照组明显减轻。对照组表现为明显可触及的凸起斑块,质硬,色红,瘢痕增生。(2)超声多普勒测量瘢痕厚度结果对照组瘢痕厚度为0.3089㎝±0.0768,实验组瘢痕厚度均数为0.2137㎝±0.0639,两样本均数t检验,t=5.72 P0.0001(0.05),两者具有统计学意义,实验组瘢痕厚度低于对照组。⑶HE染色显示:对照组瘢痕组织明显增厚,为周边正常真皮层厚度的4~5倍,大量成纤维细胞增殖,胶原纤维排列紊乱。成纤维细胞密度为355±70.812个/mm2。实验组:成纤维细胞数量明显减少。其密度为166.94±45.9个/mm2。两样本均数t检验,t=13.36 P0.0001(0.05),两者具有统计学意义,表明实验组瘢痕成纤维细胞密度低于对照组。⑷CD31免疫组化染色结果:对照组微血管数量较多,管腔不规则,较多闭塞。微血管密度为68.056±29.357个/mm2。实验组微血管数量明显减少,呈圆形、椭圆形。微血管密度为38.333±21.18个/mm2。两样本均数的t检验,t=4.93,P0.0001(0.05)具有统计学意义,表明实验组微血管密度低于对照组。⑸Masson染色结果:对照组胶原纤维多而致密粗大,排列混乱,可见漩涡状结构和胶原结节。实验组胶原纤维束间有较大的空隙,排列比较规则,大致呈水平方向. 结论:1长脉冲1064nm Nd:YAG激光治疗可以改善瘢痕颜色、质地、厚度,使瘢痕颜色变浅,质地变软,厚度变薄、表面变平整。2长脉冲1064nm Nd:YAG激光治疗可以封闭早期增生性瘢痕内的微血管。3长脉冲1064nm Nd:YAG激光治疗可使瘢痕内成纤维细胞数量减少,分泌胶原纤维数量减少,胶原纤维排列规则,呈水平状,与表面平行。4长脉冲1064nm Nd:YAG激光可以促进早期增生性瘢痕消退,对瘢痕增生具有抑制作用。


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