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脊髓型颈椎病发病机制的实验研究

高岩  
【摘要】:目的:颈椎病是中老年人的常见病、多发病之一。随着工作方式和生活方式的转变以及现在生活节奏的加快,颈椎的的发病率呈现出一个逐年上升的趋势,且发病年龄年轻化。我国颈椎病的发病率约为7.4%-13.8%,而在50岁以上人群中的颈椎病发病率逐渐上升。如今颈椎病对人们身体健康的威胁越来越严重,进而影响着人们的生活质量。临床上对颈椎病的病因分析结果显示:颈椎的退变、姿势不正、劳损、外伤、颈椎畸形、颈部肌肉病变等多种因素共同导致颈椎病,颈椎间盘的退变、突出压迫颈脊髓则是颈椎发病的最根本的因素。本实验通过模拟颈椎病发病机制,于新西兰大白兔C3椎体上植入脊髓压迫钉,造成慢性脊髓压迫,通过观察脊髓组织的微观病理变化,揭示脊髓型颈椎病发病机制。本实验通过观察慢性颈脊髓压迫模型,不同时间段所出现的细胞凋亡程度的变化,揭示细胞凋亡在颈椎病发病中的重要作用,提示抗凋亡治疗可能成为治疗脊髓型颈椎病的辅助方法之一。 方法:实验动物选用3个月月龄,雄性,新西兰大白兔共30只,体重控制在2至2.5公斤。随机分为5组,每组6只。A组:对照组,B组-E组为模型组,B组脊髓压迫3个月,C组脊髓压迫4个月,D组脊髓压迫5个月,E组脊髓压迫6个月。脊髓压迫模型建立:将实验动物采用腹腔注射地西泮0.5ml,再腹腔注射速眠新Ⅱ(0.1ml/kg)行全身麻醉后,完成各项术前准备。于甲状软骨下1cm颈前方作一纵行切口长约4cm,显露到椎体前方,确定C3椎体后,于C3椎体前方开一直径约3mm的孔,并显露脊髓。于开孔处缓慢植入事先准备好的显影树脂脊髓压迫钉,术毕缝合伤口。对照组除不植入自制脊髓压迫钉外,其他手术步骤同模型组。术后复查体感诱发电位,未见急性脊髓损伤图形。观察指标:1、运用改良的Tarlov’s运动功能评分进行行为学评估;2、皮层体感诱发电位(CSEP)检查,监测双下肢体感诱发电位的改变;3、MRI影像学检查,观察脊髓受压后脊髓信号的变化;4、取受压区域的脊髓固定后行HE染色、Bcl-2、Bax免疫组织化学染色,观察脊髓灰质及白质内细胞凋亡程度。 结果:①Tarlov’s运动功能评分结果显示:随着脊髓受压时间的延长,Tarlov’s运动功能评分逐渐降低;与对照组相比有显著性差异。②皮层体感诱发电位结果:随着脊髓受压时间延长,CSEP的波幅以及潜伏期均产生了明显的变化,从模型3个月组到模型6个月组其潜伏期P15逐渐延长;③MRI影像学检查发现:模型组兔子脊髓受压区域内T2加权像可见高信号;④组织学检测:模型组兔脊髓HE染色可见灰质及白质中神经元细胞及胶质细胞细胞体皱缩,结构紊乱,组织水肿,并随压迫时间的延长上述特征逐渐加重。Bax免疫组化染色显示:对照组脊髓灰质及白质中的细胞,Bax着色较浅,而3个月模型组脊髓灰质及白质中Bax染色阳性的细胞着色较对照组明显加深,5个月模型组与其它组相比Bax染色阳性细胞着色最深,6个月模型组Bax染色阳性细胞着色深度较5个月组有所降低(有统计学差异p0.05)。Bcl-2免疫组化染色可见:对照组脊髓细胞中有少量表达,术后3个月表达程度最高,之后逐渐下降。 结论:①通过于大白兔C3椎体内植入显影树脂脊髓压迫钉成功建立兔慢性脊髓压迫模型,能较好模拟脊髓型颈椎病发病过程。②通过观察对照组及模型组脊髓切片HE、Bax、BCl-2染色的变化,提示细胞凋亡可能是导致脊髓型颈椎病发病的原因之一,而细胞凋亡的程度与压迫时间及症状严重程度并非线性相关。


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