收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

复方中药连萸胃滞留渗透泵控释制剂的设计与评价

方瑜  
【摘要】:左金方是经典药方,为黄连、吴茱萸(6:1)二药配伍,其丸剂及胶囊剂为2010年版《中国药典》收载品种,具有抑制胃酸分泌、抗溃疡、抗菌、镇痛抗炎等药理作用,临床上常用来治疗胃部炎症及溃疡性疾病。用生物热动力学、抗幽门螺杆菌方法对左金方的药效物质进行了筛选研究证明主要活性物质以黄连、吴茱萸总生物碱类为主。已有的药代动力学研究表明,该类成分的体内吸收很差,其作用基础是在病变局部保持一定浓度才能发挥治疗作用。左金方的普通制剂如丸剂或胶囊,口服后会随胃排空迅速进入肠道,不能在胃局部保持有效的浓度,因此治疗效果不甚理想。 开发连萸胃滞留渗透泵控释给药系统,该制剂可显著减少患者服用剂量,长时间滞留于胃液中,并具有明显的零级释药特征,能够使黄连与吴茱萸的有效部位在胃中持续定量释放,可有效避免药物的突释效引起的刺激性,同时可使有效成分直达患处,可显著提高疗效和患者的依从性,使治疗胃部炎症及溃疡性疾病获得成功。 传统骨架型胃漂浮缓释制剂药物的释放与其溶解度有直接关系,对于中药复方多组分药物,由于溶解度不同,难以保证各组分同步释放。本研究制备连萸胃滞留渗透泵控释片(LIFOPT),由推动层与药物层组成,其中推动层含有轻质多孔微球,使片剂总表观密度小于水,由于浮力作用,片子漂浮于胃液中,水分渗入药物层形成软膏状药物混悬液,推动层吸水膨胀,将药物层推出释药孔。此种释药方式可保证药物层各成分完全同步释放,同时可获得明显的零级释药特征。 第一部分黄连与吴茱萸有效部位的提取分离纯化 目的:采用大孔树脂吸附技术对黄连总生物碱进行有效分离纯化并确定最佳工艺,采用中性氧化铝柱色谱对吴茱萸中生物碱和柠檬苦素进行纯化,并优化其工艺。 方法:称取黄连药材1kg,粉碎成粗粉,加入12倍体积水,回流提取3次,每次2h,合并提取液并浓缩至8L,控制上样生药质量浓度在0.10-0.15g/mL,采用AB-8大孔吸附树脂分离,纯化水洗脱杂质3BV,50%乙醇洗脱生物碱3BV,减压回收乙醇,真空干燥即得。黄连总生物碱的含量测定方法:采用Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μ m),乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(50:50)为流动相,检测波长为345nm。吴茱萸加入8倍量的70%乙醇,提取3次,每次2h,滤过,合并滤液,滤液减压回收乙醇至无醇味,加入24倍量的蒸馏水,然后用盐酸调pH值至3。静止放置2h,在4500r/min离心30min,得下层沉淀。沉淀加入24倍药材量的95%乙醇溶解后,减压回收乙醇,浸膏加入适量中性氧化铝,少量甲醇,置60℃水浴中挥干甲醇,搅拌均匀,装柱,醋酸乙酯-二氯甲烷(70:30)洗脱6BV,洗脱液减压回收溶剂,真空干燥即得。吴茱萸中柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱含量测定方法:采用DiamonsilC18色谱柱(250mm X4.6mm,5μ m),乙腈-水-四氢呋喃-冰乙酸(41:59:1:0.2)为流动相,检测波长为225nm。 结果:黄连总生物碱的含量测定方法:巴马汀、黄连碱在5~100μ g/mL,小檗碱在10.07-201.4μg/mL的浓度范围内与峰面积均呈良好的线性关系;平均回收率分别为9947%(RSD=1.29%),99.73%(RSD=1.16%)、99.41(RSD=0.99%)。黄连总生物碱平均转移率91.72%,提取物中总生物碱平均含量81.87%,其中小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱平均含量分别为48.54%、13.25%、12.83%、7.26%。吴茱萸中柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱含量测定方法:吴茱萸碱和吴茱萸次碱在10~200μg/mL,柠檬苦素在25.27-505.4μg/mL的浓度范围内与峰面积均呈良好的线性关系;平均回收率分别为99.64%(RSD=1.46%)、98.90%(RSD=1.55%)、99.00%(RSD=1.10%)。吴茱萸中有效部位平均转移率72.04%,提取物中有效部位平均含量56.45%,其中吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素平均含量分别为8.73%、17.83%、30.18%。 结论:本实验方法制备的黄连与吴茱萸的提取物中的有效部位含量均大于50%,符合有效部位的要求。 第二部分精制中间体与左金丸的药效学比较 目的:比较精制中间体与左金丸对抗大鼠实验性胃溃疡及胃酸分泌的作用,以此验证提取工艺的合理性。 方法:考察不同剂量精制中间体与左金丸对吲哚美辛胃溃疡的影响,以及对乙醇胃溃疡的影响,并考察高剂量组精制中间体与左金丸对正常大鼠胃液分泌的影响。 结果:对吲哚美辛胃溃疡的影响:精制中间体0.096、0.135g/kg及左金丸1.05g/kg组的溃疡数与对照组比较有显著性差异。对乙醇胃溃疡的影响:精制中间体0.135g/kg组及左金丸1.05g/kg组的溃疡数均较对照组显著为低。对正常大鼠胃液分泌的影响:精制中间体及左金丸均可显著减少胃液分泌量和胃酸分泌。 结论:经过主要药效学指标对比表明,精制中间体与左金丸的药效无显著差异(p0.05),说明提取精制工艺合理。 第三部分连萸胃滞留渗透泵控释片的制备 目的:采用渗透泵制剂技术,制备连萸胃滞留渗透泵控释片。 方法:连萸胃滞留渗透泵控释片的制备方法:(1)轻质多孔微球的制备:将聚丙烯酸树脂RS溶于适量乙醇-二氯甲烷中,加入0.3%十二烷基硫酸钠水溶液,50-100r/min搅拌,至油珠粒径为0.3-0.8mm时,开始缓慢升温,至40℃时固化4h,过滤,装柱,10倍柱体积热水淋洗后,干燥即得。(2)助推层的制备:将轻质多孔微球、PEO、 HPMC、氯化钠、PVPk30按处方量混合均匀,加入无水乙醇制软材,过20目筛制粒,40℃干燥12h,加入硬脂酸镁混匀。(3)含药层的制备:将精制中间体、PEO按处方量混合均匀,加入无水乙醇制软材,过20目筛制粒,40℃干燥12h,加入硬脂酸镁混匀。(4)压片与包衣:用上述助推层与含药层颗粒压制双层片芯后,用醋酸纤维素丙酮溶液包衣,在片剂的含药层表面打一直径0.8mm的小孔,即得。分别考察含药层促渗剂种类及用量、助推层渗透剂用量、包衣液中致孔剂用量、释药孔直径、片芯硬度对释药行为的影响,含药层助悬剂种类和用量对药物混悬液流变性的影响,膨胀漂浮层膨胀剂材料对膨胀速度的影响,醋酸纤维素薄膜厚度对薄膜弹性模量及断裂强度的影响,包衣液中致孔剂PEG400对醋酸纤维素(CA)膜水渗透速率的影响。在单因素考察的基础上,,以助推层膨胀剂及渗透剂的用量、包衣液致孔剂的用量作为考察因素,进行三因素三水平的正交设计优化处方。测定不同渗透压介质中渗透泵片释放度,验证介质渗透压对药物释放的影响。 结果:根据单因素考察结果,含药层促渗剂为氯化钠20mg,含药层助悬剂为PEO (Mw,200,000),用量为提取物:PEO=4:1助推层膨胀剂为PEO:HPMC=4:1,助推层渗透剂为氯化钠,包衣膜厚度控制在0.18-0.20mm。根据正交试验结果,助推层膨胀剂用量为50mg;助推层促渗剂的用量20mg;包衣液致孔剂的用量10%。以0.1mol/L盐酸溶液(加2mol/L氯化钠)为释放介质,药物释放速率明显下降,表明释放的驱动力为释放介质与制剂内部的渗透压差。 结论:按优化的处方与工艺制备的连萸胃滞留渗透泵片在12h内药物释放大于90%,释放曲线符合零级动力学方程,符合设计要求。 第四部分连萸胃滞留渗透泵控释片体外释放度研究 目的:建立HPLC法同时测定本制剂释放介质中的小檗碱、巴马汀、吴茱萸碱、吴茱萸次碱,考察本制剂的释放度并建立控制标准。 方法:HPLC方法:采用Diamonsil C18色谱柱(250mm X4.6mm,5μm),乙睛-0.025mol/L磷酸二氢钾溶液(含20mmol/L十二烷基磺酸钠,磷酸调至pH3.5)(55:45)为流动相,检测波长为225nm,流速:1mL/mino释放度测定方法:照释放度测定法(附录XD第一法),采用溶出度测定法第二法装置,以100ml0.1mol/L盐酸溶液为释放介质,转速为每min100转,依法操作,经2、4、6、8、10、12h分别取溶液2ml滤过,取续滤液测定即得。分别以0.1mol/L盐酸溶液、水及磷酸盐缓冲液(pH6.8)为释放介质,照释放度测定法进行测定,采用零级动力学方程对释放度数据进行拟合。采用f2因子法评价四种成分的释放曲线相似性。 结果:小檗碱在500.8-25.04μg/ml,巴马汀为1.914-47.85μg/ml,吴茱萸碱与吴茱萸次碱在0.1023-2.046μg/ml的浓度范围内与峰面积均呈良好的线性关系;平均回收率分别为98.84%(RSD=1.51%).99.17%(RSD=1.12%)、97.94%(RSD=1.34%)、99.46%(RSD=1.05%)。在0.1mol/L盐酸溶液、水及磷酸盐缓冲液(pH6.8)释放介质中,小檗碱、巴马汀、吴茱萸碱、吴茱萸次碱的释放度数据用零级动力学方程进行拟合,所得各回归方程r值均大于0.98,同时各成分的释放曲线相比较,f2因子均大于50。 结论:利用HPLC法建立了同时测定本制剂中小檗碱、巴马汀、吴茱萸碱、吴茱萸次碱释放度方法,经方法学验证,精密度、准确性、稳定性均符合要求,本制剂在各释放介质中的释放曲线均符合零级动力学方程,且各成分释放曲线相似,表明本品可实现各成分以恒定速度同步释放。 第五部分连萸胃滞留渗透泵控释片Beagle犬体内药动学研究 目的:建立可同时测定Beagle犬血浆中小檗碱、巴马汀的检测方法,研究连萸胃滞留渗透泵控释片中小檗碱与巴马汀在Beagle犬体内药代动力学。 方法:Beagle犬随机分成2组,采用双周期交叉试验,一组服用受试制剂连萸渗透泵片,另一组服用参比制剂连萸片,剂量均为300mg。2周后进行交叉试验。于口服给药前(0h)和给药后1、2、3、4、6、8、、10、12、24、36、48、72、96、120h h取后肢静脉血5ml,并立即移入肝素化离心管中,10000r/min离心10min,分离血浆,于-20℃冰箱中保存待测。色谱柱为Kromasil C18(250min×4.6mm,5μm),流动相:A为0.1%甲酸水溶液, B为0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱,检测波长为345nm,流速:1mL/min.采用DAS软件计算药代动力学参数。 结果:小檗碱的线性范围0.1~5.0μg/ml,日内与日间RSD15%,回收率84.16%-96.30%;巴马汀线性范围0.01~0.5μg/ml,日内与日间RSD15%,回收率81.05%~93.29%.Beagle犬口服参比制剂和受试制剂后的主要药动学参数:小檗碱:tmax分别为(3.890±1.524)h和(6.761±2.496)h,Cmax分别为(1.4073±0.3804)u g/ml和(0.8773±0.2395)μg/ml,t1/2分别为(14.26±4.85)h和(18.33±6.39)h,AUC0~96分别为(35.94±8.86)μg.ml-1·h和(39.27±7.94)μg.ml-1·h,相对生物利用度为109.3±22.1%。巴马汀:tmax分别为(4.191±1.527)h和(8.835±2.906)h,cmax分别为(0.2515±0.0719)μ g/ml和(0.1773±0.0525)μg/ml,t1/2分别为(11.47±5.63h和(16.64±5.34)h,AUC0~96分别为(7.48±2.61)μg·m-1·h和(8.54±2.39)μg·ml-1·h,相对生物利用度为114.2±31.9%。 结论:小檗碱、巴马汀体内血浆样品测定灵敏度、精密度、准确度良好,线性范围内能满足样品的分析。以小檗碱、巴马汀AUCo-96计算,受试制剂与参比制剂相比生物利用度无显著性差异,tmax明显延长,Cmax显著降低,两种制剂在Beagle犬体内生物作用等效且具有一定的缓释作用。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 程东岩,王隶书,程东红;艾附暖宫颗粒中吴茱萸次碱的含量测定[J];中成药;2003年01期
2 陈亚林;正交试验法优选吴茱萸提取工艺的研究[J];国医论坛;2004年03期
3 刘保林,吴巍巍,靳长峰,王音;吴茱萸次碱对小鼠溃疡性肠炎的治疗作用[J];中国临床药理学与治疗学;2004年11期
4 甄攀,张荣山,白雪梅,王治宝;吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的提取条件研究[J];中国药学杂志;2005年02期
5 任世禾,刘柏年;中药吴茱萸炮制工艺及质量标准研究[J];中成药;2000年09期
6 张丽丽,张丽艳,杨玉琴,李健,魏升华;不同产地吴茱萸中吴茱萸碱及吴茱萸次碱的含量对比分析[J];贵州医药;2004年08期
7 谭生建,赵炳成 ,王海涛 ,李进利 ,初锋;高效液相色谱法测定戊己丸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量[J];解放军药学学报;2002年04期
8 甄攀,张利民,王治宝,白雪梅;四神丸质量标准研究[J];中成药;2004年09期
9 朱坤福;薄层扫描法测定吴茱萸颗粒剂中吴茱萸次碱的含量[J];时珍国医国药;2003年06期
10 甄攀,白雪梅,刘淑芬;女宝胶囊中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的HPLC分析[J];张家口医学院学报;2003年04期
11 庄燕黎,晁若冰;高效液相色谱法测定吴茱萸药材及其制剂中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量[J];药物分析杂志;1997年03期
12 赵冬梅,张英,毕开顺;吴茱萸汤不同配伍情况下生物碱含量的RP-HPLC测定[J];药物分析杂志;1999年01期
13 徐艳春,魏璐雪,周玉新,王亚丽;高效液相法测定黄连与吴茱萸配伍前后吴茱萸碱及吴茱萸次碱的含量[J];中国中药杂志;2001年12期
14 张韬,张世臣,魏璐雪;吴茱萸及其炮制品中生物碱的含量测定[J];中国中药杂志;1994年07期
15 于治国!沈阳110015,侯晓虹!沈阳110015,时雅旻!沈阳110015,马俊凤!青岛266042,毕开顺!沈阳110015;HPLC测定吴茱萸及其制剂中吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量[J];中国药学杂志;1999年10期
16 禹静,让蔚请,谭桂山,徐康平,李元建;吴茱萸次碱和辣椒素对过敏反应所致血管收缩的影响[J];中南药学;2003年04期
17 路世鹏,王玉蓉;均匀设计和正交设计法优选吴茱萸提取工艺的研究[J];北京中医药大学学报;2004年05期
18 洪玉梅,范强,王智民;吴茱萸及其炮制品中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量比较[J];中国中药杂志;2005年07期
19 罗连贵;;巴马汀提取工艺的改进[J];中国医药工业杂志;1990年04期
20 刘文,李建银,邱德文;超临界流体萃取吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱[J];中国医院药学杂志;2003年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李岱;李年生;陈清泉;罗丹;邓汉武;李元建;;在自发性高血压大鼠降钙素基因相关肽介导的吴茱萸次碱的降压作用[A];湖南省生理科学会2006年度学术年会论文摘要汇编[C];2007年
2 罗旭健;巫冠萍;谭明雄;;中药吴茱萸活性成分吴茱萸次碱与牛血清蛋白作用研究[A];中国化学会第28届学术年会第7分会场摘要集[C];2012年
3 张志国;杨磊;黄开颜;陈兴;杨晖;李康;;不同炮制品吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素含量的比较研究[A];中华中医药学会中药炮制分会2011年学术年会论文集[C];2011年
4 郭惠;张拴;马丽娜;杨云云;马晓军;王昌利;;10-甲氧基吴茱萸次碱体外抗肿瘤活性研究[A];2011年全国药物化学学术会议——药物的源头创新论文摘要集[C];2011年
5 韩旭阳;边宝林;李娆娆;王智民;闫利华;王祝举;唐力英;;吴茱萸汁的定性定量分析[A];2010中药炮制技术、学术交流暨产业发展高峰论坛论文集[C];2010年
6 石典花;孙立立;;盐吴茱萸质量标准研究[A];中华中医药学会中药炮制分会2011年学术年会论文集[C];2011年
7 张新峰;裘福荣;蒋健;高成璐;;左金丸类方的小檗碱、巴马汀、黄连碱和药根碱在Caco-2细胞转运的比较研究[A];第十次全国中医药传承创新与发展学术交流会暨第二届全国中医药博士生优秀论文颁奖会议论文集[C];2011年
8 涂瑶生;刘法锦;孙冬梅;庄玉坚;;黄连、吴茱萸药对的HPLC指纹图谱研究[A];2010年全国中药学术研讨会论文集[C];2010年
9 李健哲;彭军;李元建;;降钙素基因相关肽介导了吴茱萸次碱对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌重构的保护作用[A];湖南省首届生理—药理科学青年论坛论文摘要汇编[C];2009年
10 李元建;;吴茱萸心血管作用的有效成分及机制研究进展[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 黄雪君;黄连吴茱萸药对在药物吸收模型上的生物表达研究[D];广州中医药大学;2011年
2 方瑜;复方中药连萸胃滞留渗透泵控释制剂的设计与评价[D];河北医科大学;2012年
3 马腾文;8-烷基巴马汀同系物的合成与药理活性评价[D];西南大学;2011年
4 魏宝阳;中药吴茱萸道地性形成相关因子的研究[D];湖南农业大学;2012年
5 胡长平;辣椒素受体介导吴茱萸次碱的降压和心脏保护作用[D];中南大学;2003年
6 李俊芬;喹啉、异喹啉类生物碱发光探针与ctDNA相互作用的研究[D];山西大学;2008年
7 王怡薇;基于肠—肝灌流模型的戊己丸配伍机制的研究[D];中国中医科学院;2011年
8 李岱;降钙素基因相关肽与高血压及吴茱萸次碱的治疗作用[D];中南大学;2008年
9 周知;降钙素基因相关肽抗高血压内皮祖细胞衰老作用和机制的研究[D];中南大学;2009年
10 陈清泉;一氧化氮合酶/一氧化氮途径对降钙素基因相关肽合成与释放的影响[D];中南大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 赵金明;吴茱萸药材质量、药代动力学及组织分布的研究[D];辽宁中医药大学;2011年
2 言议超;平衡施肥对吴茱萸林土壤酶活性及植株生长的影响研究[D];江西农业大学;2012年
3 曹亮;吴茱萸遗传多样性分析及适宜产区规划[D];湖南中医药大学;2011年
4 邵立立;基于古今药方纵横的吴茱萸减毒增效配伍规律研究[D];山东中医药大学;2011年
5 姜建辉;吴茱萸次碱型生物碱的全合成研究[D];兰州大学;2010年
6 高崇佳;黄连—吴茱萸药对配伍比较研究[D];辽宁中医药大学;2011年
7 鲍天冬;戊已丸提取物不同配伍的药物动力学实验研究[D];中国中医科学院;2007年
8 邱时祎;吴茱萸中生物碱的分离纯化和质谱表征[D];华东理工大学;2013年
9 辛龙涛;中药厚朴与吴茱萸有效成分的毛细管电泳分析[D];重庆大学;2005年
10 张桂华;中药体外毒性试验及其毛细管电泳研究[D];广西民族大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978