褪黑素对内毒素血症大鼠血管反应性改变的影响及其机制探讨

【摘要】： 目的：血管反应性异常是内毒素血症的重要病理生理改变之一，主要表现为体循环血压下降和早期的肺动脉高压。已知内毒素血症时内毒素主要活性成分脂多糖(lipopolysaccharides，LPS)诱发的血管各层组织氧化性损伤是导致血管反应性改变的重要原因，同时LPS还可引致血管内皮细胞源性舒张因子一氧化氮(nitric oxide,NO)，一氧化碳(carbon monoxide,CO)及其相关酶类的异常表达和生成，加重血管反应性紊乱。近年研究发现褪黑素(melatonin,MT)是体内一种具有抗氧化效能的神经内分泌激素，已证实MT可以对抗多种物质的氧化损伤作用，但MT对内毒素血症时血管反应性改变有何作用尚未报道。本实验通过建立大鼠内毒素血症模型，观察MT对内毒素诱导的体循环和肺循环血管反应性有何影响，并探讨可能的作用机制，为内毒素血症的防治提供新的途径。 方法：实验主要观察内毒素血症时MT对胸主动脉和肺动脉这两部分血管反应性的影响。 实验用Sprague-Dawley大鼠随机分为4组(1)对照组：生理盐水，i.p.：(2)LPS组：LPS4mg／kg，i.p.；(3)LPS+MT组：LPS4mg／kg，i.p.。MT在给予LPS之前30min和之后60min，各5mg／kg，i.p.；(4)MT组：MT5mg／kg，i.p.，90min后再次给予。LPS或生理盐水注射后6h处死大鼠，MT组第二次给药后5h处死动物。制备离体胸主动脉血管环(thoracic aortic 中文摘要 呐s，TARs页肺动脉血管环 （Pulmonar artey nngs，m－x～），分 别对这两部分各 4组血管环进行测定：门）对 10h。l／L新福 林忡enxh加七eJ卫）的收缩值及对 10Anol／L 乙酚胆碱 （acetylcholine，ACh）的内皮依赖性舒张反应；（2）对 10人10－’m卜LpE和 ACh的累积浓度反应曲线；3）为探讨NO， CO在其中的作甲，各组血管环用诱导型NO合酬制剂氨基 肌（anunogu灿dhe，AG）或非选择性NO合酬韦剂t－石基 精氨酸（N“初trO－L－呢ie，L－NNA）gb血红素氧合酸1meme oXygenase4 HO刁）抑制剂许叶咐原（洲c Protoporphynn factoralpha，ZnPP）分别孵育 20分钟后再次测定血管环对 PE。 ACh的张J变化。 制备各组胸主动脉和肺动脉组织匀浆，测定超氧化物歧化 酶（supero。de dlsmutes，SODL丙二醛（malondiaWde，MDA） 和NO含量变化。制备光镜及扫描电镜标本，观察血管形态学 变化。 实验所得数据分为胸主动脉和肺动脉两部分，统计学处理 分别在这两部分（每部分各4组）内独立进行。各组数据均用 均数士标准差以土SD）表示，统计学处理为组间差异用单因 素方差分析，有显著差异者进一步用Newinan－Kuels q检栅 行两两比较，给药前后厅配对t检验，以尸o．05为显著性差 巳 ＃。 结果：TARs LPS组对 PE门“mol／L）的收缩反应较对照 组减弱J们．m），PE累积剂量反应曲线右移；LPS组对ACh （ 0“mol／L）的舒张反应与对照组比较虽有下降趋势，但无统 计学差异。pRs LPS组对 ACh门八）的舒张反应较对 照组降低（＊州＊），＊＊h剂量反应曲线右移：但对PE的收缩 中文摘要 反应无明显变化。 TARs LPS肌猕 PE门讪l／L）的收缩反应较 LPS组 明显增高p们．of），但 氏于对照组p们．05），PE累积剂量 反应曲线介于 LPS组和对照组之间。RARs LPS＋MT删 ACh O）的舒张反应较 LPS组增高（P＜0．of），与对照组 无明显差异，ACh剂量反应曲线较LPS组左移。 TARs和PARs中的Afl’组反应性较对照组均无明显变化。 TARs各组用 10“moljLAG、10”’mol／L ZnP预孵育 20Inin 后 LPS组和 LPS＋MT组对PE的收缩反应均明显提高（P＜0．05）， 但孵育前后对ACh的舒张反应无显著变化。PARs各组在用 10“mO皿 AG、106mO凡 Mp预孵育 Zbo 后，LpS组和 LPS皿组对PE的收缩反应明显提高p川．05），LPS组对 ACh的舒张反应较对照组降低，其余各组对ACh的舒张反应 无显著改变。10AnOMi LiN：NA预孵育 20nlln后，TARs和 RARs 各组在孵育前后对 ACh的舒张反应均明显a，对 PE的收缩 反应均显著增加p们．of人 与对照组相比LPS组胸主动脉和肺动脉组织NO、MDA 含量显著增高，SOD活性显著下降（P们．05人LPS皿组与 LPS组比较SOD后性显著增高，MDA、NO水平显著陶阮 市动脉LPS＋Nl’组NO水平与LPS组比较无显著变化。 光镜和电镜观察，LPS组血管结构严重受损，而MT可减 轻血管的病理形态学改变。 结论：l、MT可显著改善LPS诱导的主动脉对缩血管剂 的低反应性，同时抛转LPS硼币动脉内皮懒性舒张反应的 抑制。2、Nl’的保护机制与LPS的损伤作用均与NO有关， 本实验提示MT对iNOS有一定的抑制作用，而对dqOS的影 3