水蛭汤促进皮瓣愈合机理的研究

【摘要】： 目的：研究中药水蛭汤促进新生血管形成、提高皮瓣成活率机理。 方法：选用100只Wister大鼠，随机分为5组，每组20只动物，背部做7.5×3cm~2大小随意皮瓣的动物模型。术后各组应用生理盐水、小剂量肝素、单味水蛭、VEGF、水蛭汤进行治疗。采用常规病理组织学、组织形态计量方法，逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法及免疫组织化学方法(ABC法)对皮瓣愈合不同阶段(术后4、14天)皮瓣成活率、(术前、术后1、4、7、14、21天)血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA、VEGF表达情况进行检测，研究水蛭汤对皮瓣愈合的影响，探讨其机理。 结果：①病理观察：各组术后早期均见皮瓣肿胀，随时间延长，单味水蛭组、VEGF组、水蛭汤组皮瓣肿胀程度降低，皮瓣坏死少。②各组皮瓣成活率：术后4天各组无显著差异(P＞0.05)。术后7天单味水蛭组、VEGF组、水蛭汤组明显高于其他两组，有显著性差异(p＜0.05)。③RT-PCR方法检测VEGFmRNA的结果：术后1天，5组VEGFmRNA的表达无明显差异，但均高于术前；术后4-7天，单味水蛭组、水蛭汤组VEGFmRNA的表达明显强于其它3组，术后14天，这两组仍能检测到相当量的VEGF表达；而其它3组此时已检测不到VEGFmRNA的表达。④免疫组化检测VEGF：VEGF在对照组和治疗组中的表达 中文摘要 均呈阳性，但程度不一。皮瓣组织在术后第1天，其VEGF 的表达强于术前组，且以VEGF组最高；术后4天，生理盐水 组、肝素组VEGF阳性细胞量与术前组相比，无明显差异， 单味水蛙组、VEGF组、水蛙汤组则差异显著，且呈上升 趋势，术后7天，单味水蛙、水蛙汤组阳性细胞量明显多 于其余 3组，术后 14天，VEGF阳性细胞的逐渐下降，但 仍多于正常，至第川天，接近正常。 结论：本实验采用Wister大鼠背部皮肤（带肉膜）组 织做超比例随意皮瓣模型，操作简单、重夏性好，是比较 理想的动物皮瓣模型。应用单味水蛙、VEGF蛋自、水蛙 汤治疗可明显促进微血管的生成，改善皮瓣的血供状态， 提高皮瓣的成活率。水涯汤属于祖国传统中药制剂，无毒 副作用，我们推测其治疗外科皮瓣愈合的机理是：①水蛙 汤制剂能诱导机体VEGFmRNA的表达，使组织VEGF蛋 白含量增加，促进皮瓣吻合区微血管再生；②水蛙汤中水 蛙素具有消除肿胀、抑制血栓形成，为微血管形成侧枝循 环赢得时间；③水蛙汤具有清热解毒、益气生肌、镇痛抗 炎的作用。因此，水蛙汤是外科皮瓣术后用药的理想选择。