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卵巢切除大鼠主动脉晚期糖化终末产物和血脂的变化及大豆异黄酮的干预作用

葛喜珍  
【摘要】: 女性进入更年期后,由于卵巢机能衰退,雌激素水平下降,内分泌失调,引起脂代谢紊乱,从而诱发或加重动脉粥样硬化,使冠心病(CHD)的发生和死亡率明显增加。绝经后的动脉粥样硬化是包括各种因子在内的多因素之间交叉作用的结果。目前,国内外大量研究证明,晚期糖化终末产物(AGEs)在动脉粥样硬化的发生发展中起了不容忽视的作用,AGEs能启动或加重动脉粥样硬化。因此AGEs与衰老、动脉粥样硬化的密切关系正日益引起学术界的关注。AGEs生成路径复杂,主要与糖代谢紊乱、氧化反应、自由基的发生有关。女性进入更年期雌激素水平下降,是否能促进AGEs水平升高及其在主动脉积累?AGEs与绝经妇女脂代谢紊乱之间是否存在一定相关性?此方面的研究尚未见报道。有研究表明,卵巢切除大鼠骨组织AGEs水平明显升高,故本实验借助卵巢切除模型,模拟绝经后状态,重点观察AGEs水平的变化及其在主动脉累积情况,并探讨AGEs与脂代谢的关系。实验选择AGEs特异性抑制剂氨基胍作为对照,探讨AGEs在卵巢切除大鼠动脉损伤中的病理意义,以期阐明绝经妇女冠心病发生率增高的部分病理机制。 流行病学调查结果表明,长期食用大豆的东亚人群中,心血管疾病、妇女更年期综合症等疾病的发生率明显低于西方。大量实验研究证明这与大豆中的异黄酮密切相关,因此大豆异黄酮在防治老年退行性疾病方面倍受世人瞩目,但确切的作用机制目前尚不完全明确。《食物本草》对大豆“补肾”作用加以描述,《别录》谓其“下瘀血”。《中药大辞典》记载大豆中的异黄酮具有类雌激素作用。祖国医学认为,动脉粥样硬化的发生与“痰浊"、“血瘀 ”有关,属于“痰”、“瘀”的范畴,其病机多与肝肾两虚,脾失健运,痰浊内生,脉络瘀阻有关。研究发现补肾中药多含黄酮类植物雌激素,后者是补肾方药发挥作用的主要成分之一。本研究利用大豆异黄酮的类雌激素作用,从补肾入 WP=5 手,解决“痰”、“瘀”问题,使脉络通畅,达到标本兼治的作用。研究发现黄酮类,如水飞蓟宾能抑制AGEs的形成,大豆异黄酮对AGEs的影响尚未见报道。本研究在阐明卵巢切除对大鼠晚期糖化终末产物和血脂影响的基础上,观察大豆异黄酮对大鼠主动脉保护作用及其机制,为合理分析和评价大豆异黄酮对绝经妇女心血管系统保护作用的意义与应用提供依据。 第一部分 卵巢切除对大鼠主动脉晚期糖化终末产物和血脂的影响 目的:探讨卵巢切除对大鼠晚期糖化终末产物和血脂的影响。 方法:选用6月龄SD雌性大鼠20只,随机分为假手术组(sham)、卵巢切除组(OVX)。去除双侧卵巢3个月2周后,所有大鼠禁食24小时,股动脉放血处死大鼠,取血清用于AGEs、血脂及相关生化指标的测定。取主动脉弓及部分胸主动脉行连续切片,HE染色,观察其病理形态学的变化;其余主动脉用于组织AGEs测定。 结果: 1.主动脉形态学变化 假手术大鼠主动脉壁各层结构完整,内膜光滑,中膜平滑肌细胞排列整齐。卵巢切除大鼠主动脉局部内膜不完整,内皮有脱落,表面有单核细胞粘附现象;主动脉弹性纤维紊乱,局部内膜明显增厚,有脂质沉积;平滑肌细胞数目增多,排列紊乱,细胞核肿胀,有向内膜迁移的迹象。 2.血脂的变化 与假手术组比较,卵巢切除组大鼠血清甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)均明显升高,高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)明显降低(P0.05或P0.01)。 3.血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的变化 与假手术组比较,卵巢切除大鼠血清MDA明显升高,SOD明显降低(P0.05或P0.01)。 4.血清NO的变化 与假手术组比较,卵巢切除组大鼠血清NO水平显著降低(P0.01)。 5.血清和主动脉AGEs及血糖的变化 WP=6 与假手术组比较,卵巢切除组血清和主动脉AGEs明显升高(P0.01)。各组大鼠血糖差异无显著性(P>0.05)。 6.主动脉AGEs与血清OX-LDL呈直线正相关,相关性系数r=0.941(P0.01)。 小结: 卵巢切除大鼠除存在明显的脂质代谢紊乱外,血清和主动脉中存在AGEs显著升高的现象。卵巢切除大鼠主动脉AGEs与血清OX-LDL含量存在明显正相关,提示AGEs水平升高与脂代谢紊乱密切相关。卵巢切除大鼠主动脉出现动脉粥样硬化的早期损伤。 第二部分 大豆异黄酮对卵巢切除大鼠晚期糖化终末产物和血脂 的影响 目的:探讨大豆异黄酮对卵巢切除大鼠晚期糖化终末产物和血脂的影响。 方法:选用6月龄SD雌性大鼠30只,随机分为卵巢切除组(OVX)、卵巢切除+氨基胍组(OVX+AG)和卵巢切除+大豆异黄酮组(OVX+ISO)。去除双侧卵巢2周后治疗3个月,实验结束时,所有大鼠禁食24小时,股动脉放血处死大鼠,取血清用于AGEs、血脂及相关生化指标的测定。取主动脉弓及部分胸主动脉行连续切片、HE染色,观察大豆异黄酮对卵巢切除大鼠主动脉形态学的影响;其余主动脉用于组织AGEs测定。 结果: 1.主动脉形态学变化 与卵巢切除组比较,大豆异黄酮治疗组主动脉病理损伤得到明显改善,内皮较完整,单核细胞粘附现象明显减少;无明显的内膜增生现象,平滑肌细胞排列较整齐,未见明显的细胞增生。氨基胍组与卵巢切


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