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杂色曲霉素对食管鳞状上皮细胞影响的实验研究

佟盼琢  
【摘要】: 目的:杂色曲霉素(sterigmatocystin, ST)是致癌性真菌毒素,是我国食管癌高发区居民饮食中的主要污染真菌毒素之一。本研究室以往研究发现,采用河北省太行山区居民正在使用的酸菜汤样品、杂色曲霉菌素污染的玉米面以及纯化的杂色曲霉素灌胃的动物诱癌实验研究中,可以见到肺腺癌和胃不典型增生,但均未发现诱发食管癌。杂色曲霉素作为食管癌的病因尚缺乏足够的证据。 机体的免疫功能状态是影响肿瘤发生的一个重要因素,恶变细胞可通过多种机制逃避机体的免疫监视,使机体的免疫系统出现障碍而无法对肿瘤细胞进行识别和杀伤。本研究室以往研究证实,ST可诱导人外周血单核细胞(human peripheral blood mononuclear cell,HPBMc)中的淋巴细胞发生凋亡,并在一定时间(2~48小时)和剂量(0.125~2.0mg/L)范围内呈正相关,对HPBMc细胞表面HLA-Ⅰ分子表达呈剂量依赖性下降。 有研究发现我国食管癌高发区食管癌组织与正常组织相比,HLA-Ⅰ表达下降,并且HLA-Ⅰ的下调与病理分级、淋巴转移等呈正相关。为了从免疫方面进一步探讨ST在食管癌发生中的可能作用,进行了以下实验: 1应用细胞培养、免疫组化、流式细胞术方法研究了ST对体外培养的人食管鳞状上皮细胞HLA-Ⅰ表达的影响。 2为探讨ST处理食管鳞状上皮HLA-Ⅰ表达影响的可能机制用细胞培养、Weston Bolt和RT-PCR相结合的办法,研究了ST对体外培养的人食管鳞状上皮细胞TAP1、LMP2表达的影响。 3为探讨食管异常情况下,ST对食管鳞状上皮致癌的可能作用,应用病理观察、免疫组化和原位杂交的方法研究了ST处理反流性食管炎大鼠食管鳞状上皮PCNA、TAP1、LMP2蛋白和TGFβ2 mRNA的表达情况。 方法: 1人食管鳞状上皮细胞的培养


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