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乙酰肝素酶与肝癌侵袭转移关系的研究

王顺祥  
【摘要】:肝细胞肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,恶性程度高,易早期发生转移,而且手术或介入治疗后复发率较高,原因在于肝癌易侵袭转移。明确其侵袭转移的发生机制和探索有效的治疗方法依然是临床上面临的严峻挑战。研究发现肿瘤细胞的侵袭转移与细胞外基质、血管基底膜降解及肿瘤微血管生成密切相关。硫酸乙酰肝素蛋白多糖是细胞外基质和血管基底膜的主要成分。乙酰肝素酶是一种葡萄糖醛酸内切酶,也是目前发现的唯一可以降解HS活性的酶,它通过切断硫酸乙酰肝素蛋白多糖侧链以降解细胞外基质和血管基底膜,并且能释放和活化硫酸乙酰肝素蛋白多糖结合型的生长因子(如bFGF,VEGF等)诱导血管生成,从而促进肿瘤细胞的侵袭和转移。随着乙酰肝素酶与肿瘤侵袭转移关系研究的深入进行,乙酰肝素酶将成为肿瘤治疗的新靶点。 第一部分 乙酰肝素酶在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义 目的:通过对肝细胞肝癌的癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织及肝癌细胞株中Hpa mRNA表达的检测,研究Hpa mRNA表达与HCC侵袭转移等生物学特性之间的的关系,明确HCC侵袭转移机制和在分子水平干预肿瘤细胞穿越由细胞外基质和基底膜组成的屏障,进而抑制肿瘤血管生成,预防复发和转移提供理论和实验依据。 方法:提取43例肝细胞肝癌手术切除肿瘤组织、癌旁肝组织及10例正常肝组织标本的RNA,采用逆转录-聚合酶链式反应技术(RT-PCR),检测Hpa mRNA在肝细胞肝癌、癌旁肝组织及正常肝组织中的表达,以β-actin作为内参照标准,对扩增产物通过凝胶扫描仪进行DNA电泳条带的密度值分析,将Hpa与β-actin比值作为Hpa表达水平的参数,对Hpa产物相对定量。以相同的方法检测人肝细胞癌细胞株SMMC-7721细胞和人肝细胞癌细胞株BEL-7402细胞中的Hpa mRNA表达,不作半定量分析。 结果:1 43例肝癌组织中有26例(60.5%)即HpamRNA阳性表达,17例微弱表达或不表达。43例癌旁肝组织中仅有2例(4.7%)阳性表达,5例仅微弱表达,其它不表达。10例正常组织不表达。肝癌组织、癌旁肝


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1 杨明;RNA干涉技术平台的建立及肝癌侵袭转移相关基因RNA干涉研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
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