收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

实时三维超声对晚孕胎鼠大脑神经细胞的生物学影响

栗建辉  
【摘要】: 超声波用于诊断疾病及产前诊断已近45年的历史,其对人体产生的生物效应及安全性始终是人们关注的焦点,经过多年的研究人们认识到诊断级超声波辐照剂量存在着时间-强度关系,即大剂量、高强度的超声对机体组织可瞬间产生损害作用,小剂量、低强度超声波长时间辐照也会对人体组织产生不良后果。超声安全问题实际上就是产科胚胎和胎儿的超声检查安全的问题,因为在早孕期只要几个胚胎细胞受损,就有可能造成严重的不良后果,如畸形和缺陷,因此有许多超声工作者对超声的生物学损害做了大量研究。随着电子与计算机技术的不断进步超声在产科领域的检查类型也不断更新,早期使用的是二维B型超声(黑白超声)用以观察胎儿的切面图像,随后又发明了频谱多普勒和彩色多普勒用以观察脐带血流及胎儿心血管的血流情况。上述的几种超声检查技术已有大量的研究成果,也基本得出了相应的结论,近年来由于三维超声和四维超声(实时三维超声)不断用于产前超声诊断,总的超声辐照时间延长,为胎儿的安全性带来了潜在的危害,因此,对后两种超声检查技术作用于胚胎后所产生的生物学效应及其危害做相应的研究是一项紧迫的任务。以往的学者对超声的生物学损害主要是做临床上的病例对照研究和队列研究,自韩国学者Oh等人应用凋亡细胞做研究后认为超声辐照后检测细胞凋亡率可作为确定超声检查是否安全的一个生物学指标。从此各国学者应用电镜技术或多种组织化学方法来确定超声辐照后组织器官中的细胞凋亡率,以获得各自研究的相关数据。如应用透射电镜技术方法、应用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL)、应用Caspase酶测定法间接确定凋亡细胞情况等。美国学者Ang等人运用组织化学手段来确定孕小鼠经超声辐照后对胎鼠大脑神经元迁移的影响。这些研究为机体超声生物学效应的研究开辟了新的领域。 本研究分为三个部分,第一部分是利用光学显微镜、透射电子显微镜技术观察孕小鼠接受不同时间段实时三维超声辐照后对胎鼠大脑神经细胞的生物学影响,主要观察病理损害和凋亡细胞情况等形态学改变。第二部分是利用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法、Caspase3,9酶活性测定来确定实时三维超声辐照后小鼠大脑神经细胞的凋亡情况及相关酶的表达。第三部分是在实时三维超声辐照前给予孕16d母鼠DNA复制标记物BrdU,标记胎鼠大脑脑室附近的未分化神经细胞,不同时间段实时三维超声辐照后在生后第10d观察幼鼠那些被BrdU标记的大脑神经细胞的迁移情况。 第一部分实时三维超声对晚孕胎鼠大脑神经细胞形态学的影响 目的:探讨不同实时三维超声辐照剂量对晚孕胎鼠大脑神经细胞形态学改变的观察。 方法:30只孕鼠随机等量分配到对照组、假辐照30min组、辐照5min组、辐照10min组、辐照20min组及辐照30min组。辐照组在孕鼠孕16 d时行实时三维超声辐照。假辐照组实施辐照操作,但仪器不发射超声波。每组选生后24h乳鼠10只,取大脑右侧顶叶做标本,透射电镜下观察。其余乳鼠于生后10 d行灌流固定,取大脑标本,HE染色光镜观察。 结果:光镜结果:对照组、假辐照组、辐照5min组及辐照10min组光镜观察未见明显异常,辐照20min组及30min组,神经细胞排列紊乱,部分神经细胞坏死。电镜结果:对照组、假辐照组、辐照5min组未见明显异常;辐照10min组可见部分线粒体膨大,嵴断裂,内质网呈空泡化,偶见凋亡细胞;辐照20min、30min组线粒体与粗面内质网异常改变增多,细胞核异染色质凝集、边集,观察到典型的凋亡小体,凋亡细胞明显增多。 结论:实时三维超声辐照超过10min可引起大脑神经细胞形态改变和凋亡细胞增加。 第二部分实时三维超声辐照后TUNEL法及Caspase3、Caspase9免疫组织化学技术观察小鼠大脑组织中细胞凋亡变化 目的:探讨实时三维超声辐照后小鼠大脑细胞凋亡及Caspase3、Caspase9的表达及其意义。 方法:30只孕鼠随机等量分配到对照组、假辐照30min组、辐照5min、辐照10min、辐照20min及辐照30min组。辐照组在孕鼠孕16 d时行实时三维超声辐照,假辐照组实施辐照操作,但仪器不发射超声波。每组选生后10d乳鼠10只,行灌流固定,取大脑标本,HE染色光镜观察、原位末端标记(TUNEL)法检测凋亡大脑细胞、比色法测定Caspase3和Caspase9活性。 结果:TUNEL法标记结果:辐照5min组凋亡细胞表达率与对照组和假辐照组间比较差异无统计学意义。辐照10min组凋亡细胞开始增多,辐照20min、30min组凋亡细胞表达率明显增强,与其他各组相比差异具有统计学意义;Caspase3和Caspase9结果:Caspase3平均光密度及Caspase9阳性细胞百分数均随着辐照时间的延长而增强、增多,除对照组与假辐照组比较无统计学意义外,其他各组两两比较均有统计学意义。 结论:实时三维超声辐照可引起小鼠大脑神经细胞凋亡增加,相关凋亡基因Caspase3、Caspase9蛋白合成增加,活性升高,诱发神经细胞凋亡。 第三部分三维超声辐照后对晚孕胎鼠大脑神经细胞迁移的影响 目的:对晚孕小鼠进行不同时间段实时三维超声辐照后观察幼鼠大脑神经细胞迁移的情况。 方法:30只孕鼠随机等量分配到对照组、假辐照30min组、辐照5min、辐照10min、辐照20min及辐照30min组。辐照组在孕鼠孕16 d时行实时三维超声辐照,在辐照前24h、16h、8h分别在孕鼠腹腔内注射BrdU50mg/kg,假辐照组和对照组也在孕16d时每8h腹腔注射5-溴脱氧尿苷嘧啶(BrdU)50mg/kg,共注射3次。假辐照组实施辐照操作,但仪器不发射超声波。每组选生后10d乳鼠10只,行灌流固定,取大脑标本,HE染色光镜观察,行抗BrdU免疫组化染色,观察大脑皮层各部BrdU阳性细胞数及分布情况,并比较它们之间的差异。 结果:辐照组BrdU阳性细胞到达大脑皮质浅层减少,停留在深层较多,随着辐照时间的延长,此种情况越来越明显,对照组和假辐照组之间比较无统计学意义,对照组与各辐照组,假辐照组与各辐照组比较均有统计学意义。大脑皮质深层(6~10层)BrdU+细胞阳性率的构成比较对照组、假辐照组与各辐照组间差别有统计学意义(χ2=139.1, P0.01),随辐照时间的延长,大脑皮质深层BrdU+阳性细胞构成有增加的趋势。 结论:实时三维超声辐照晚孕胎鼠时间过长可影响大脑神经细胞的迁移。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 胡萍,张天艳,周星,孙皓;膝关节类风湿性关节炎的三维超声诊断[J];上海医学影像;2004年04期
2 程中伟,黄昊;超声诊断的新突破——实时三维超声像[J];医疗卫生装备;2003年S1期
3 李威;赵向东;高庆军;;实时三维超声诊断胎儿骨母细胞瘤1例报告[J];吉林医学;2008年16期
4 齐青;三维超声在肝脏疾病的诊断应用[J];上海医学影像;2000年01期
5 张伟红;陈红燕;李伟华;陶红;竺笑;常才;;实时三维子宫输卵管超声造影临床应用初步探索[J];上海医学影像;2011年02期
6 朱宗昌;三维超声心动图重建的图像显示[J];中国临床医学影像杂志;1994年03期
7 田家玮,肖竹影;三维超声心动图对冠心病的研究进展[J];中国医学影像技术;1994年04期
8 郑昭伦;三维超声心动图对冠心病的研究进展[J];中国超声医学杂志;1996年09期
9 阙绪光,强梅;三维超声检测二尖瓣病变患者左室收缩功能[J];影像诊断与介入放射学;1997年01期
10 蔡爱露!110003沈阳市,解丽梅!110003沈阳市,竹内久弥,郭淑香!110003沈阳市,丛杰!110003沈阳市,刘守君!110003沈阳市;三维超声对胎儿正常唇及唇裂的诊断评价并与传统二维超声诊断对照分析[J];中国超声医学杂志;2001年03期
11 佘志红,黄幼珍,胡纲,林铤,陈汉荣,黄三菊,王新房;三维超声在产科检查中的应用[J];中国医学影像技术;1994年04期
12 黄定九,朱宗昌;三维超声心动图技术及其临床应用研究现状[J];心功能杂志;1995年02期
13 滕淑琴,刘志聪,李运秀,蔡洁;三维超声在胃疾病诊断中的应用[J];中国超声医学杂志;1999年08期
14 蔡爱露,解丽梅,郭淑香,刘守君;三维超声表面模式诊断无脑儿实用价值探讨[J];中华超声影像学杂志;2002年03期
15 蔡爱露,黄丽萍,李晶,王冰,郭淑香,刘守君;应用三维超声透明模式诊断胎儿脊柱裂[J];中华超声影像学杂志;2002年06期
16 刘广健 ,徐辉雄 ,谢晓燕 ,刘丽 ,徐作峰 ,黄蓓 ,吕明德 ,黎东明;三维超声体积自动测量技术测量肝脏肿瘤体积的临床研究[J];中国超声医学杂志;2003年01期
17 金鑫,尹永杰,赫荣军;三维超声在肾囊肿穿刺中的应用[J];中国超声诊断杂志;2004年02期
18 徐辉雄,徐作锋,吕明德,谢晓燕,刘广健,黄蓓;三维超声在肝脏疾病介入性诊疗中的应用[J];医学临床研究;2004年03期
19 滕淑琴,刘志聪,蔡洁,范霜月;三维超声成像在肾肿块诊断中的应用[J];中国超声诊断杂志;2005年04期
20 颜怀新,张天艳,匡久树;二维/三维超声在肝移植病人术后监测中的应用[J];现代医药卫生;2004年12期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李玉曼;谢明星;王新房;吕清;袁莉;姜岚;段凤霞;宋钺;张宁;;新的实时三维超声半自动定量工具评价正常人左室容积和射血分数的可行性和重复性研究[A];第十届全国超声心动图学术会议论文[C];2010年
2 李淑萍;陈玲;安睿;;实时三维超声在胎儿畸形筛查和诊断中的临床应用价值[A];中国超声医学工程学会第三届全国妇产及计划生育超声医学学术会议论文汇编[C];2010年
3 孔令秋;唐红;何佰永;韦馨;;单心动周期实时三维超声对扩张型心肌病左心室收缩功能的评价[A];第十届全国超声心动图学术会议论文[C];2010年
4 龙莎;胡萍香;;三维超声在小乳癌超声诊断中的应用[A];中国超声医学工程学会第三次全国浅表器官及外周血管超声医学学术会议(高峰论坛)论文汇编[C];2011年
5 王锡斌;张国帅;赵春梅;;三维超声在介入治疗腘窝囊肿的应用[A];中国超声医学工程学会第三次全国浅表器官及外周血管超声医学学术会议(高峰论坛)论文汇编[C];2011年
6 解左平;;三维超声立体成像评价胎儿小脑蚓部发育及其临床意义[A];2011年浙江省超声医学学术年会论文汇编[C];2011年
7 常才;;实时三维超声在产科临床的应用价值[A];中华医学会超声医学新进展学术会议论文汇编[C];2004年
8 冯美芬;张必莉;;经阴道腔内三维超声在宫腔疾病中的应用价值[A];2011年浙江省超声医学学术年会论文汇编[C];2011年
9 肖珍;马小燕;;三维超声对胎儿肺体积的研究[A];中华医学会第十次全国超声医学学术会议论文汇编[C];2009年
10 朱江;;膀胱占位性病变三维超声的研究[A];2007年浙江省超声医学学术年会论文汇编[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 栗建辉;实时三维超声对晚孕胎鼠大脑神经细胞的生物学影响[D];河北医科大学;2010年
2 赵蓓;单心动周期实时三维超声对肥厚型心肌病左室局部舒张功能的评估及心肌肌球蛋白结合蛋白C基因突变相关超声研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2012年
3 楼海亚;胎儿颅脑容积的三维超声研究[D];中国协和医科大学;2010年
4 刘奇;二尖瓣反流超声三维重建与定量评价方法[D];四川大学;2004年
5 付曼丽;实时三维超声心动图对复杂先天性单心室畸形的心功能评价以及预后评估的临床研究[D];华中科技大学;2009年
6 李凌;二维、三维超声检测胎儿胸腺及胎儿先心病与22q11微缺失关联性探讨[D];中南大学;2010年
7 傅先水;一体化三维超声成像的实验研究及临床应用[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
8 韩红;超声新技术在移植肝及其血管并发症血流动力学评估中的价值探讨[D];复旦大学;2009年
9 蔡爱露;胎儿唇腭裂的三维超声扩展成像与相关基因突变检测及其mRNA表达研究[D];中国医科大学;2007年
10 李文波;甲状腺结节三维超声及超声引导下甲状腺穿刺的临床研究[D];中国协和医科大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 徐芳;多平面三维超声诊断膀胱肿瘤及其术前分期[D];青岛大学;2011年
2 王玺;三维超声对正常胎儿肛管及周围肌肉显像的研究[D];中国医科大学;2010年
3 范敏容;第11-13周胎儿鼻后三角的二维三维超声观察和测量的研究[D];中南大学;2011年
4 林昱;三维超声容积法判定下肢动脉狭窄程度的价值[D];吉林大学;2011年
5 黄蕊;三维超声造影诊断附件小肿块的价值[D];新疆医科大学;2012年
6 陶文鸿;单心动周期三维超声评价房缺患者封堵术前后右室功能的变化[D];遵义医学院;2012年
7 怡兰;实时三维超声在诊断心内膜垫缺损中的应用研究[D];内蒙古医学院;2011年
8 周爽;经阴道三维超声对绝经后正常子宫内膜及内膜良恶性病变的诊断价值[D];复旦大学;2010年
9 肖珍;三维超声对胎儿肺发育不良的应用探讨[D];广州医学院;2010年
10 李佳晶;三维超声测定下肢动脉容积的临床价值[D];吉林大学;2012年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 毓星;形象逼真的三维超声[N];中国人口报;2003年
2 围城;“神经芯片”检测信号出入生物体一路畅通[N];大众科技报;2006年
3 郝冬梅;推广实时三维超声 有效降低出生缺陷[N];中国医药报;2007年
4 衣晓峰靳万庆;电针可促进BMSC分化为神经细胞[N];中国中医药报;2007年
5 葛秋芳;RHO蛋白质与摧毁神经细胞有关[N];医药经济报;2007年
6 记者 钱铮;腹部脂肪干细胞可转为神经细胞[N];新华每日电讯;2009年
7 记者 闫龑;专家呼吁启动VSEL干细胞研究[N];健康报;2009年
8 周道奇编译;雌激素“劝”中风者神经细胞别自杀[N];大众科技报;2002年
9 记者刘爱成;死人脑可提取活神经细胞[N];人民日报;2002年
10 成都军区总医院 张虎军;好环境可以让人更聪明[N];健康报;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978