收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

Nrf2和HO-1在实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓中的表达及依达拉奉保护作用的研究

张巧莲  
【摘要】: 目的:多发性硬化(multiple sclerosis, MS)是一种中枢神经系统自身免疫性脱髓鞘疾病,目前MS的发病机制尚不完全清楚。近年来,越来越多的研究表明:氧化应激在神经系统炎症反应脱髓鞘及轴突损伤中发挥着重要的作用。多项研究表明,MS患者及啮齿动物EAE模型中,存在有氧化应激反应。依达拉奉是国内近几年开发上市的一种新型的小分子自由基清除剂,易透过血脑屏障,其主要通过捕获羟自由基抑制脂质过氧化、抑制脑细胞(血管内皮细胞、神经细胞)过氧化作用,减轻脑水肿和脑组织损伤。近年来有学者发现依达拉奉可以抑制活化的小胶质细胞的活性氧簇(ROS)和一氧化氮的产生及iNOS mRNA的表达,并减轻小胶质细胞诱导的神经元死亡及树突毒性现象。活化的小胶质细胞被认为与炎症性脱髓鞘疾病的发病有关,因此提示依达拉奉对MS可能具有治疗价值。 本研究采用Wistar大鼠建立EAE模型,应用不同剂量的依达拉奉注射液进行干预,观察药物对大鼠发病情况和组织病理改变的影响,并测定大鼠脊髓中Nrf2及HO~(-1)表达水平的变化,旨在探讨依达拉奉对MS的作用及机制,为临床实践提供理论基础。 方法: 1动物分组:将90只6-8周龄健康雌性Wistar大鼠,体重180-200g,随机分为正常对照组、EAE模型组、地塞米松(dexamethasone, DXM)组、依达拉奉小剂量组(3 mg·kg~(-1)·d~(-1))、依达拉奉大剂量组(10 mg·kg~(-1)·d~(-1)),每组各18只。每组又随机分为7天、16天、23天三个亚组,每个亚组6只大鼠。 2模型制备:将新鲜豚鼠全脊髓制成匀浆,加上完全福氏佐剂(complete Freund's adjuvant, CFA),佐剂中所含卡介苗的剂量为6mg/ml,充分混合抽打制成油包水乳剂,后按0.5ml/只分别于大鼠四肢足垫和背部皮下注射。药物治疗组于模型制备第一天起给予相应剂量的药物腹腔注射,药物每天一次持续给至动物处死时为止。 3神经功能评分:于动物免疫诱导当日及免疫后每天对动物的体重变化、精神状态、活动情况进行观察,并对动物进行神经功能评分,采用Kono等提出的评分标准:1分:动物尾部无力;2分:尾部无力+肢体无力;3分:肢体轻度麻痹;4分:肢体严重麻痹,被动翻身后不能复原;5分:濒死状态。 4组织病理学:在动物麻醉状态下,快速取其大脑侧脑室周围及脊髓颈、胸、腰膨大处组织,4%多聚甲醛固定,石蜡包埋,组织切片,HE染色和三色染色在光学显微镜下观察组织病理变化。 5脊髓中Nrf-2和HO-1表达的测定:将实验动物于免疫后第7天、16天、23天时麻醉后快速取脊髓颈、胸、腰膨大处组织,4%多聚甲醛固定,石蜡包埋,组织切片,应用SP法进行免疫组化,光学显微镜下观察阳性细胞,并计数。 结果: 1动物发病率观察:依达拉奉大剂量组和DXM组大鼠的发病率均低于EAE组,差异有统计学意义(P0.05)。依达拉奉小剂量组与EAE组大鼠之间的发病率差异没有统计学意义(P0.05)。 2行为学观察:各组大鼠在发病高峰期时神经功能评分比较,依达拉奉大剂量组、DXM组各大鼠神经功能评分明显低于EAE组(P 0.05)。依达拉奉小剂量组与EAE组之间神经功能评分差异没有统计学意义(P0.05)。 3组织病理学观察:在疾病初期,EAE组大鼠组织内即出现炎性细胞浸润,且炎性细胞数目的多少与疾病严重程度相一致。在发病高峰期,依达拉奉大剂量组、DXM组大鼠组织内炎症细胞浸润形成的血管袖套数目明显低于EAE组及依达拉奉小剂量组(P0.05);依达拉奉大剂量组和DXM组,EAE组和依达拉奉小剂量组大鼠组织内炎症细胞浸润形成的血管袖套数目差异没有统计学意义(P0.05)。疾病缓解期各组大鼠组织(P0.05)。三色染色显示各组的轴突及髓鞘均发生破坏,但依达拉奉大剂量组的轴突及髓鞘损伤较EAE组和依达拉奉小剂量组轻。 4脊髓中Nrf-2和HO-1的表达:各组大鼠的Nrf-2和HO-1表达均较对照组上调,依达拉奉大剂量组的表达数目最高,且与其他组比较差异具有统计学意义(P0.05),EAE组和依达拉奉小剂量组之间的表达差异没有统计学意义(P0.05)。 结论: 1 EAE大鼠模型中的Nrf-2和HO-1表达上调,同时依达拉奉大剂量治疗组的上调更明显。 2依达拉奉可以降低EAE大鼠的发病率,减轻发病时神经功能损伤的程度。 3依达拉奉可以减轻EAE大鼠大脑和脊髓内炎性细胞浸润的程度。 4依达拉奉可能是通过上调Nrf-2和HO-1的表达来发挥抗氧化应激的作用。 5依达拉奉与地塞米松比较,虽然地塞米松在发病率和神经功能评分上优于依达拉奉,但是依达拉奉可以避免长期应用地塞米松引起的严重不良反应,充分显示出应用安全和耐受性良好的优势。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 陈林;戴爱国;胡瑞成;;慢性阻塞性肺疾病大鼠NRF2和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达的改变[J];中国应用生理学杂志;2008年03期
2 邵洛林;许伟华;周成军;王洪波;郭建强;;Nrf2在小鼠非酒精性脂肪性肝病发病机制中的作用[J];山东大学学报(医学版);2010年03期
3 张海峰;王锋;曹戬;;Nrf2减轻小鼠非酒精性脂肪性肝炎[J];基础医学与临床;2014年03期
4 王梅芳;戴爱国;胡瑞成;;Nrf2调控抗氧化酶与慢性阻塞性肺疾病[J];国际内科学杂志;2008年02期
5 王笑亮;王汉东;;Nrf2在中枢神经系统疾病中的神经保护作用[J];医学研究生学报;2011年07期
6 孙健;许伟华;周成军;郭建强;;Nrf2与非酒精性脂肪性肝病小鼠肝细胞凋亡的关系[J];中国现代医学杂志;2011年04期
7 马海芬;董方元;胡晓娜;保志军;;Nrf2和自噬对非酒精性脂肪性肝病的作用机制[J];国际消化病杂志;2014年02期
8 杨蓓;丁金兰;陈雪;;亚砷酸钠对胰岛β细胞的Nrf2及其调控的抗氧化酶表达的影响[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2012年06期
9 陈楠;胡容;郭青龙;;Nrf2在肿瘤化学预防中的研究进展[J];药物生物技术;2010年05期
10 江刚;戴爱国;;PI3K/Akt-aPKC_(ι/ζ)-Nrf2调控大鼠气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达[J];中国应用生理学杂志;2011年01期
11 江刚;戴爱国;胡瑞成;;香烟烟雾提取物经aPKC_(ι/ζ)-NRF2上调大鼠气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达[J];基础医学与临床;2010年08期
12 何惠君;王国玉;高渊;于志文;;姜黄素活化肝细胞Nrf2抗氧化系统效应及缓解胰岛素抵抗作用机制研究[J];热带医学杂志;2012年07期
13 赵曙光;李强;王景杰;王旭霞;刘震雄;闻勤生;;姜黄素诱导Nrf2核转位对氧化应激诱导人肝细胞胰岛素抵抗的影响[J];现代生物医学进展;2011年01期
14 赵曙光;李强;王景杰;王旭霞;刘震雄;闻勤生;;磷脂酰肌醇3-激酶信号通路在姜黄素诱导肝细胞转录因子Nrf2核转位中的作用[J];胃肠病学和肝病学杂志;2011年02期
15 闫惠琴;马力;周清华;;Nrf2在肿瘤化学防御方面的研究进展[J];中国肺癌杂志;2011年07期
16 王欣;董丹丹;邢晓越;李炜;李冰;;姜黄素干预对慢性饮水砷暴露小鼠肝脏Nrf2信号通路的影响[J];中国地方病防治杂志;2012年06期
17 李晶菁;张霞;陈瑜;蔡丹磊;黄中伟;;Nrf2在脓毒症大鼠肝组织中的表达及姜黄素的干预作用[J];重庆医学;2013年24期
18 王宏;刘刚;符炜;徐宁;戴体俊;;Nrf2在丙泊酚抑制内毒素性急性肺损伤中的作用[J];中国药理学通报;2013年09期
19 李洁;戴爱国;王梅芳;胡瑞成;朱黎明;;PGC-1α与Nrf2协同调控γ-谷氨酰半胱氨酸合酶对大鼠COPD的作用[J];中国呼吸与危重监护杂志;2009年06期
20 黄龙;王汉东;朱林;周渊;丛子翔;;miR-153靶向Nrf2对胶质母细胞瘤细胞株U251凋亡的影响[J];中国实用神经疾病杂志;2013年19期
中国重要会议论文全文数据库 前7条
1 何国祥;况立洪;;过表达Nrf2对大鼠心肌微血管内皮细胞迁移及成血管能力的影响[A];中华医学会第十五次全国心血管病学大会论文汇编[C];2013年
2 高军丽;戴爱国;;PERK、Nrf2与γ-谷氨酰半胱氨酸合酶在大鼠慢性阻塞性肺疾病肺组织中的表达[A];中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集[C];2010年
3 李洁;戴爱国;王梅芳;胡瑞成;朱黎明;;PGC-1α与Nrf2协同调控γ-谷氨酰半胱氨酸合酶对大鼠慢性阻塞性肺疾病的作用[A];中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集[C];2010年
4 戴爱国;胡瑞成;;Nrf2在慢性阻塞性肺疾病中的抗氧化应激/内质网应激作用[A];中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集[C];2010年
5 邓蕙妍;朱慧兰;;Nrf2激活剂抵御皮肤氧化损伤作用机制的研究进展[A];中华医学会第十八次全国皮肤性病学术年会论文汇编[C];2012年
6 邓蕙妍;朱慧兰;;Nrf2激活剂抵御皮肤氧化损伤作用机制的研究进展[A];第八届全国光生物学学术会议论文摘要集[C];2013年
7 李煌元;石年;钟玉芳;黄新;;溴氰菊酯诱导大鼠脑组织自由基生成和激活转录因子Nrf2[A];中国毒理学会第二届全国中青年学者科技论坛会议论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 况立洪;转录因子Nrf2对大鼠心肌微血管内皮细胞在血管生成中作用的影响及其机制的体外研究[D];第三军医大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈林;Nrf2及其信号激酶调节γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶在慢性阻塞性肺疾病中的作用[D];南华大学;2006年
2 海燕;非小细胞肺癌细胞中Nrf2的调控与生物学功能研究[D];浙江大学;2011年
3 曲丽艳;非小细胞肺癌细胞中Nrf2信号通路抑制作用的研究[D];浙江大学;2010年
4 邵洛林;Nrf2在小鼠非酒精性脂肪性肝病发病机制中的作用[D];山东大学;2010年
5 席海鹏;Nrf2在神经胶质瘤细胞增殖中的作用[D];中南大学;2013年
6 李茹;Nrf2在实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中表达及莱菔硫烷保护作用机制研究[D];河北医科大学;2012年
7 张巧莲;Nrf2和HO-1在实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓中的表达及依达拉奉保护作用的研究[D];河北医科大学;2010年
8 宋璞;NRF2、HO-1基因多态性与白癜风罹患危险的关联性研究[D];第四军医大学;2013年
9 袁玲玲;预防性应用曲克芦丁对STZ糖尿病大鼠认知功能障碍及海马Nrf2表达的影响[D];河北医科大学;2014年
10 袁华;1-溴丙烷对中枢神经系统损伤及机制研究[D];山东大学;2014年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978