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甘薯组织培养和人工种子的研究

周丽艳  
【摘要】: 甘薯是以块根进行无性繁殖的作物,研究甘薯人工种子较其它作物具有更重要的意义。目前,大多数甘薯品种的体细胞胚发生频率低,制约了甘薯人工种子的发展。本研究以冀东地区两个主要甘薯品种“138”、“一窝红”为试材,对体细胞胚诱导、发生及植株再生进行了探讨。用带腋芽茎段作繁殖体进行人工种子初步研究。 1.愈伤组织的诱导 将两个品种的茎段分别接种于附加不同浓度蔗糖、琼脂、肌醇、不同pH值的MS培养基上。结果表明,蔗糖浓度25g/L,琼脂0.8%,肌醇0.1%,pH值5~6有利于愈伤组织生长。 将两个品种的叶片、叶柄、茎段分别接种于附加不同种类和浓度的植物生长调节剂的MS培养基上,发现愈伤组织的产量和质量有很大差别。用1mg/L 2,4-D与KT(6-BA)搭配诱导的愈伤组织质地松脆,颜色淡黄,但是2,4-D浓度过高如4mg/L不利于愈伤组织生长。而NAA代替2,4-D使用,所诱导的愈伤组织质地坚硬,颜色淡绿。不同基因型之间也有差别,2,4-D浓度较低时,“一窝红”长势比“138”好。在三种外植体中,叶片形成的愈伤组织最多。 2.胚性与非胚性愈伤组织 诱导的愈伤组织有三种类型:第一种是NE型,颜色灰白,结构疏松,生长旺盛。其组成细胞为长条形等不规则形状,富含液泡。第二种为E型(胚性愈伤组织),颜色淡黄,质地松脆,表面有凸起,生长缓慢。第三种是G型,表面光滑,质地坚硬。E型和NE型愈伤组织可以转化。继代培养有利十提高胚性愈伤组织比率。 3.器官分化 将不同外植体的愈伤组织在不同培养基上进行器官分化。根的分化较容易,最高分化率达100%。芽的分化,最高分化率为33.3%。茎段和叶片比叶柄容易分化出芽。 4.液体培养 培养60天的“一窝红”胚性愈伤组织切碎在附加0,0.5,1,2,4mg/L 2,4-D的液体MS培养基中悬浮培养。不加2,4-D有利于体细胞胚发生。0.5-1.mg/L有利于悬浮系保持。 5.利用带芽茎段作繁殖体进行人工种子研究 将带不同长度腋芽的茎段用4%和6%的海藻酸钠包裹,用2%Cacl_2为固化剂,制成人工种子。在不同萌发基质上萌发。腋芽长度在一定范围内与萌发率呈正相关。海藻酸钠的最佳浓度是4%。萌发基质中加入MS和多菌灵有利于萌发。最高萌发率为62.5%。


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