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绿色木霉液体发酵对大青叶中功能成分影响研究

张若鸿  
【摘要】:研究人员发现许多野菜具有降血压、降血脂、抗氧化、抑制肿瘤、降低胆固醇含量、防治心血管疾病等功能,大青叶就是具有这样特点的山野菜种类。鉴于植物的有效成分往往包裹在细胞壁内,功能成分的利用率大大降低,而细胞壁的主要成分是纤维素,所以用纤维素酶破坏植物细胞壁,可以提高有效成分提取率和利用效率。真菌可以通过分泌到胞外的游离纤维素酶来水解纤维素。采用霉菌发酵产生纤维素酶,将被细胞壁包裹的功能成分释放出来,可以提高山野菜中的有效成分含量,最大程度的提高功能性成分的利用效率。因此,本文对大青叶中的β-葡聚糖、黄酮等功能成分进行了检测,建立了这些有效成分的检测方法;同时,对利用微生物发酵来提高这些有效成分含量的技术进行了研究,结果如下: 检测表明,大青叶冻干粉中含有β-葡聚糖、黄酮等可降血压、降血糖以及降胆固醇的成分。与通用刚果红测定方法相比,用HPLC检测β-葡聚糖可以克服刚果红测定方法实际操作中的费时费力,β-葡聚糖不易被充分提取,显色体系不稳定等问题,且采用HPLC检测β-葡聚糖结果稳定可靠,操作更加简便、快捷。 基于国家药典提供的黄酮检测程序,本项研究摒弃了普遍采用的1%AlCl3显色浓度,改进采用0.1%AlCl3的显色浓度,采用紫外分光光度法测定黄酮含量,不仅做到了测定结果稳定可靠,而且克服了原测定方法带来的测试结果均为负值、显色不稳定的问题。 对绿色木霉(Trichoderma viride)AS3.4004发酵大青叶汁液提高β-葡聚糖、黄酮的含量的研究结果表明,经菌株发酵后,大青叶发酵液中的β-葡聚糖、黄酮含量有了很大提高;确定了绿色木霉适宜的发酵工艺条件为葡萄糖10g/L,尿素0.300g/L,起始pH 5.5,摇床转速150r/min,发酵温度28℃,接种量5%。在此发酵工艺条件下,大青叶中的β-葡聚糖含量由起始的0.71mg/ml增加到31.66mg/ml,黄酮含量由0.51mg/ml增加到0.96mg/ml;同时,经发酵后,大青叶冻干粉中获得了原先未检测到的果糖成分。


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