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山杏良种资源的RAPD分析

李振江  
【摘要】: 山杏(Armeniaca.sibirica(L.)Lam.),蔷薇科,李亚科,杏属,通常为落叶灌木或乔木,耐寒、耐旱、耐瘠薄等,杏仁营养丰富,具有很高的经济、药用价值,叶、花、树皮、树根也均可入药。主要分布于河北、辽宁及内蒙古等地,作为防风固沙的优势树种。过去对山杏的研究主要集中在栽培、嫁接技术等方面,而选育种、资源分类等方面的研究较少,本试验在张家口赤城县进行丰产、晚花及其他特异类型初选的基础上,结合表型性状,利用RAPD分子标记技术对初选种质进行了分类和遗传关系分析,为山杏种内分类、种质特性和遗传改良等研究提供理论依据。主要结果如下: 1)以山杏新鲜叶片为材料,研究了山杏RAPD分析过程中的影响因素,包括Taq DNA聚合酶、Mg~(2+)、dNTP、引物、模板DNA、Buffer浓度,建立了适合山杏RAPD反应的PCR体系,即20μL反应体系中含有Taq DNA聚合酶1.0U,Mg~(2+)2.0mM,4种dNTP各0.1mM,引物0.5μM,模板DNA50ng,Buffer1×。 2)扩增程序为:94℃预变性4min;94℃变性1min,36℃2退火1min,72℃延伸1.5min,10个循环;94℃变性30s,36℃退火40s,72℃延伸60s,30个循环;最后72℃延伸5min。 3)从S系列47个引物中筛选出能稳定扩增的18个引物,用这些引物对22个山杏优株进行扩增,均具有多态性。共扩增出138条带,每个引物扩增的DNA带数在5~14条之间,平均每个引物扩增6.27条带,其中多态性带113条,多态性达81.9%。 4)应用NTSYSpc2.11a软件计算相似系数介于0.68~0.83,并应用UPGMA法将22份山杏供试材料在相似系数为0.72处分成6个类群,进而分析了各单株间的亲缘关系,为应用RAPD分子标记对山杏种资源进行分类及优株选择等方面的研究奠定了基础。


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