收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

玉米大斑病菌2A型蛋白磷酸酶基因的克隆与功能分析

郝杰  
【摘要】: 由玉蜀黍大斑刚毛座腔菌(Setosphaeria turcica)引起的玉米大斑病是玉米生产上的重要病害之一,其发生和流行,不仅造成严重的经济损失,而且降低了玉米的品质。研究表明,许多植物病原真菌的生长、发育都受细胞跨膜信号转导途径的调控,如MAPK信号途径、cAMP信号途径及Ca2+信号途径等。研究信号转导途径对玉米大斑病菌生长和发育的调控作用,有利于深入了解病菌的发育和侵染寄主的分子机制,对研究病原真菌与寄主植物之间的互作以及植物病害防治也具有重要的理论意义。 PP2A是一种主要的丝/苏氨酸磷酸酶, PP2As已被证实通过调控某些基因的转录、RNA拼接及翻译过程,对不同生物的信号转导、新陈代谢以及细胞周期方面发挥重要的作用。 为了明确PP2A与玉米大斑病菌分生孢子萌发、附着胞形成及致病性之间的关系,实验利用PP2A特异性抑制剂—斑蝥素(Cantharidin)初步研究了玉米大斑病菌PP2A的功能。结果显示,Cantharidin对玉米大斑病菌菌丝生长及分生孢子的萌发均具有明显的抑制作用,且抑制率随抑制剂浓度升高而增强;并且可引起芽管的缩短和不规则膨大。此外,Cantharidin也可以导致病菌粗毒素的生物学活性明显降低。由此说明PP2A可以通过影响菌丝及芽管的极性生长,而调控玉米大斑病菌的菌丝及分生孢子发育;同时参与病菌的毒素合成。 根据已知植物病原真菌PP2A-C和PP2A-B基因的保守核苷酸序列设计简并性引物,以玉米大斑病菌基因组DNA为模板,扩增获得了PP2A-C和PP2A-B基因的同源片段。利用Genome Walking技术对所得的基因片段进行延伸,获得了1600 bp的全长PP2A-C基因和2425 bp PP2A-B基因片段。Southern杂交技术确定了PP2A-C基因在玉米大斑病菌基因组中以单拷贝形式存在。 为进一步研究基因功能,试验构建了PP2A-C基因的同源重组型基因敲除载体。对PP2A-C基因的基因敲除载体质粒利用PEG介导法转化玉米大斑病菌的原生质体,潮霉素筛选共获得了15个稳定的转化子。以潮霉素磷酸转移酶基因hph为探针,经Southern杂交验证,确定了转化子E为突变体。对E突变体进行表型分析,发现其生长速率和致病性明显降低。 以上结果表明玉米大斑病菌PP2A基因对病菌形态建成、分生孢子萌发、附着胞形成、致病性有调空作用。为进一步研究玉米大斑病菌的致病机理以及植物与病原物分子互作和开发新的植物病害防治方法奠定了基础。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 邢继红;董金皋;;玉米大斑病菌菌丝蛋白单克隆抗体制备[J];植物病理学报;2006年02期
2 董金皋,康绍兰,王艳霞,和有杰,黄梧芳;玉米大斑病菌Helminthosporium turcicum致病毒素产生的条件及其特性[J];河北农业大学学报;1993年02期
3 桂秀梅,董金皋,侯晓强;中国2001年玉米大斑病菌生理小种鉴定[J];河北农业大学学报;2003年04期
4 韩建民,姜丽,王惠哲,董金皋;玉米大斑病菌HT-毒素对玉米叶片木质素含量的影响[J];沈阳农业大学学报;2000年05期
5 马继芳,范永山,张静柏,董金皋;玉米大斑病菌原生质体的制备[J];河北农业大学学报;2003年03期
6 张建成,范永山,董金皋;玉米大斑病菌毒素对玉米叶肉细胞脂氧合酶活性的影响[J];植物病理学报;2003年05期
7 纪伟波;何海军;赵松涛;焉山;付东波;;黑龙江玉米大斑病菌生理分化研究[J];玉米科学;2010年01期
8 ;玉米大斑病国外文献汇编[J];天津农业科学;1974年01期
9 兰光燮,王宗明,陆宁,李雷松,周建华,周艳;黔西北地区玉米大斑病菌(Helmithosporium turcicum Pass)生理小种研究[J];西南农业学报;1993年04期
10 董金皋,闫淑娟;玉米大斑病菌HT-毒素对玉米细胞CAT酶活性的影响[J];植物病理学报;1999年04期
11 宋宪军;赵洪池;赵文双;;玉米大斑病的防治方法[J];农村实用科技信息;2010年07期
12 姜晶春;藩顺法;尹志;;玉米大斑病菌生理小种鉴定续报[J];吉林农业科学;1991年01期
13 董金皋,贾建航,李正平,刘国振,王江柱;玉米大斑病菌生理小种同工酶的薄层扫描图谱[J];玉米科学;1995年03期
14 刘爱国,张成和;河北省玉米大斑病菌生理小种监测初报[J];河北农业大学学报;1996年02期
15 宋庆涛,张国珍,董金皋;玉米大斑病菌原生质体的制备与再生[J];微生物学通报;2003年02期
16 邢继红,徐淑华,董金皋;玉米大斑病菌菌丝蛋白电泳分析及抗体检测[J];植物病理学报;2003年04期
17 王绍新;董金皋;;玉米大斑病菌特异性毒素组分分离条件的优化研究[J];微生物学通报;2006年02期
18 朱友林,刘纪麟;玉米3种单基因对大班病菌的抗性比较研究[J];华中农业大学学报;1995年02期
19 刘云惠,张利辉,董金皋;高效液相色谱对玉米大斑病菌毒素的分离与制备[J];河北大学学报(自然科学版);2005年05期
20 孙淑琴;温雷蕾;董金皋;;玉米大斑病菌的生理小种及交配型测定[J];玉米科学;2005年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 宋庆涛;张国珍;董金皋;;玉米大斑病菌原生质体的制备与再生[A];中国植物病理学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2002年
2 张桂珍;王伟伟;刘金亮;张世宏;张艳华;潘洪玉;;吉林省玉米大斑病菌交配型的检测[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
3 郝志敏;李志勇;董金皋;;玉米大斑病菌磷酯酶C基因(StPLC-1)的克隆与功能分析[A];中国植物病理学会2008年学术年会论文集[C];2008年
4 董金皋;张建成;韩建民;赵光耀;;玉米大斑病菌HT-毒素与玉米细胞LOX酶活性的关系[A];中国植物病理学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2002年
5 王茜;王苗苗;郝志敏;董金皋;;不同碳源对玉米大斑病菌PKA-C基因表达规律的影响[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
6 王伟伟;张桂珍;刘金亮;张世宏;赵文生;彭友良;潘洪玉;;玉米大斑病菌T-DNA插入突变体库构建及致病相关基因的克隆[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
7 王伟伟;李桂华;刘金亮;张世宏;张艳华;潘洪玉;;玉米大斑病菌T-DNA插入突变体库的创建及致病相关基因克隆[A];中国菌物学会第五届会员代表大会暨2011年学术年会论文摘要集[C];2011年
8 曹志艳;温雷蕾;刘士伟;董金皋;;玉米大斑病菌黑色素合成酶基因3hnr的克隆与功能分析[A];中国植物病理学会2008年学术年会论文集[C];2008年
9 赵巍;王青;郝志敏;韩建民;董金皋;;玉米大斑病菌PKC基因同源重组载体的构建及启动子序列分析[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
10 刘建光;董金皋;;利用ATMT技术对玉米大斑病菌进行遗传转化及条件的优化[A];中国植物病理学会2006年学术年会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前6条
1 申珅;玉米大斑病菌cAMP磷酸二酯酶基因调控病菌发育的功能研究[D];河北农业大学;2013年
2 曹志艳;玉米大斑病菌黑色素合成途径相关基因的克隆及功能分析[D];河北农业大学;2009年
3 李志勇;调控玉米大斑病菌生长发育和致病性的CaM基因的克隆与功能分析[D];河北农业大学;2008年
4 郝志敏;玉米大斑病菌G蛋白和磷脂酶C基因的克隆与功能分析[D];河北农业大学;2008年
5 赵辉;玉米大斑病菌(Exserohilum turcicum)生理分化和遗传多态性研究[D];沈阳农业大学;2009年
6 谷守芹;调控玉米大斑病菌生长发育和致病性的STK基因的克隆与功能分析[D];河北农业大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 姚晓霞;光调控与玉米大斑病菌黑色素合成途径基因的表达关系研究[D];河北农业大学;2010年
2 张桂珍;玉米大斑病菌生理小种鉴定及球毛壳菌对其生防作用研究[D];吉林大学;2012年
3 郝杰;玉米大斑病菌2A型蛋白磷酸酶基因的克隆与功能分析[D];河北农业大学;2010年
4 郭丽媛;中国北方玉米产区玉米大斑病菌生理小种监测及遗传多样性分析[D];河北农业大学;2013年
5 申珅;玉米大斑病菌腺苷酸环化酶基因的克隆与功能分析[D];河北农业大学;2010年
6 高金欣;东北地区玉米大斑病菌(Exserohilum turcicum)生理分化和遗传多态性研究[D];沈阳农业大学;2011年
7 辛媛媛;黄顶菊内生细菌对玉米大斑病菌拮抗机理初探[D];河北农业大学;2012年
8 李青为;玉米大斑病菌黑色素合成酶基因St4HNR功能分析和胞外黑色素研究[D];河北农业大学;2010年
9 赵巍;PKC调控玉米大斑病菌致病性的机理研究[D];河北农业大学;2011年
10 王晶晶;StPP2A-c基因调控玉米大斑病菌致病性的机制研究[D];河北农业大学;2013年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 通讯员郭鸿涌 记者刘廉君;河北自然科学基金攻关农业病虫害[N];科技日报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978