收藏本站
收藏 | 论文排版

顺铂损伤后毛细胞再生来源及SHH信号通路在毛细胞再生过程中调控作用的研究

郑茵  
【摘要】:[背景]铂类抗癌药是临床常见的具有耳毒性的药物。随着铂类抗癌药物研究的迅速发展,顺铂已成为癌症化疗不可缺少的药物之一。然而大剂量的顺铂可导致双耳感音神经性耳聋,且给药的浓度越高其风险也越大,顺铂引起的感音神经性聋是影响肿瘤患者化疗剂量、时间甚至治疗效果的重要因素,开展动物实验以探索顺铂耳毒性的发生机制,为应用顺铂的患者提供听觉保护,是研究顺铂耳毒性的最终目的。在实验中发现相对于新霉素损伤,顺铂损伤可以延缓毛细胞的再生,但对于顺铂能否抑制增殖再生,若能抑制,其机制是如何仍未能明确。有研究证实,Shh在耳蜗发育和毛细胞形成过程中起调节作用,而在毛细胞再生过程中,Shh信号通路起到的作用及机制仍不十分清楚。本课题组前期研究中发现Shh信号通路与顺铂损伤后毛细胞的再生过程存在一定的关系。有鉴于此,我们利用顺铂建立斑马鱼耳毒性模型以研究斑马鱼幼鱼在顺铂损伤后侧线毛细胞的再生来源,并进一步研究Shh信号通路在斑马鱼幼鱼侧线毛细胞再生过程中的表达及意义。[目的]探究斑马鱼幼鱼在顺铂损伤后侧线毛细胞的再生及其来源;以及Shh信号通路在顺铂损伤后斑马鱼幼鱼侧线毛细胞再生过程中的表达及作用。[方法](1)采用顺铂溶液处理受精后5天(5dpf)斑马鱼幼鱼,撤药后采用Brdu溶液处理斑马鱼幼鱼一定时间后撤药,采用FM1-43FX、Brdu双染色标记增殖细胞与毛细胞。(2)采用Western blot检测顺铂处理后及顺铂与Shh信号通路抑制剂处理后的Shh,Smo,Ptc1和Gli1在侧线毛细胞再生过程的表达情况,并且分别采用Shh信号通路特异性抑制剂PF-5274857及激动剂Smoothened Agonist(SAG)HC1处理斑马鱼幼鱼对比侧线毛细胞再生情况。[结果](1)实验组Brdu处理6到48小时后Brdu阳性细胞数多于对照组Brdu阳性细胞数,且实验组大多数FM1-43FM染色阳性毛细胞与Brdu阳性细胞重合,对照组增殖细胞数目未与FM1-43FX染色阳性毛细胞重合。(2)对照组中可以检测到Shh,Smo,Ptc1和Gli1蛋白。与对照组相比,经过顺铂处理的斑马鱼幼鱼在移除顺铂后Shh通路中Shh,Smo,Ptc1和Gli1蛋白表达量显著下降,随着时间推移Shh,Smo,Ptc1和Gli1蛋白表达量逐渐提高,经过抑制剂处理后Shh,Smo,Ptc1和Gli1蛋白表达量明显小于对照组,且其蛋白表达不随时间延长而增加。采用Shh信号通路抑制剂处理斑马鱼幼鱼后斑马鱼幼鱼侧线毛细胞神经丘数目明显少于对照组,而采用激动剂则多于对照组。[结论]1.顺铂损伤斑马鱼后侧线再生毛细胞主要来源于支持细胞增殖再生;2.Shh信号通路参与了斑马鱼幼鱼侧线神经丘的正常发育及功能维持;3.Shh信号通路在斑马鱼再生过程中被激活,参与了侧线毛细胞的再生过程,并发挥正向调控作用。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前16条
1 任艳芳;姜永杰;张秀玲;姜姗;王玉红;;SHH信号通路对子痫前期患者滋养细胞凋亡和侵袭的影响及其机制[J];吉林大学学报(医学版);2018年03期
2 何莉;奚维东;李姣;;冬凌草甲素干预SHH信号通路抑制人结肠癌细胞SW1116增殖的实验探讨[J];临床和实验医学杂志;2018年14期
3 管韶宇;贾彬;闫慧明;;SHH在GES-1和其他胃癌细胞中表达差异性的比较[J];中国医疗前沿;2011年07期
4 蔡清河;涂海健;余加和;;Patched基因在恶性肿瘤中的表达及其临床意义[J];医学综述;2009年04期
5 许逸卿;肖勇;陶红发;刘云宏;;Shh信号阻断对胰腺癌PANC-1细胞生物学行为的影响[J];中国现代医学杂志;2008年17期
6 赵华;张凯;;Shh基因与消化道肿瘤的关系[J];医学综述;2013年02期
7 刘东升;崔岩;申仑;杜延平;李桂林;王任直;王岩;张波;;SHH-N基因腺相关病毒表达载体的构建及其对神经干细胞增殖相关基因的影响[J];基础医学与临床;2011年03期
8 冯晓雪;刘丹彦;;Sonic hedgehog信号通路调节痛觉敏化的研究进展[J];临床与病理杂志;2015年05期
9 尹雪;李新建;洪梅;;Sonic Hedgehog信号通路与内皮细胞功能的研究进展[J];华中科技大学学报(医学版);2012年04期
10 张凤成;李亚男;;核因子C(Nfic)在人类牙根和骨组织发育中调控作用研究进展[J];口腔颌面修复学杂志;2017年02期
11 冯晓雪;杨晓秋;刘丹彦;;环巴明抑制SHH信号通路缓解大鼠神经病理性疼痛[J];基础医学与临床;2016年05期
12 赵红;吴晓君;刘赞华;王苏平;闫旭;;局灶性脑缺血大鼠纹状体区域Shh信号通路成分的表达变化及对髓鞘修复的影响[J];中风与神经疾病杂志;2016年07期
13 牛广义;白宏英;曾志磊;陈苗苗;刘花艳;;特异激活SHH信号通路对急性脑缺血大鼠NGF、BDNF表达的影响[J];中风与神经疾病杂志;2013年10期
14 梁新军;魏少忠;;Shh信号通路阻断对人结肠癌细胞HT-29增殖、侵袭的影响及机制探讨[J];山东医药;2016年18期
15 张思;李雪;刘元林;周向东;张萍萍;童英;张毅;;宫颈癌中MTSS1基因与Shh信号通路的关系研究[J];军事医学;2016年06期
16 朱美霖;白宏英;曾志磊;张沛琳;;特异性激活SHH通路对急性脑缺血大鼠血管再生影响[J];中风与神经疾病杂志;2012年12期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 赵斌;蜂毒素对人肝癌细胞株生长的抑制作用及部分表观遗传学机制研究[D];安徽医科大学;2016年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郑茵;顺铂损伤后毛细胞再生来源及SHH信号通路在毛细胞再生过程中调控作用的研究[D];南方医科大学;2018年
2 刘惠刚;SHH信号通路在顺铂损伤后斑马鱼幼鱼侧线毛细胞再生过程中的表达及意义[D];南方医科大学;2017年
3 余雪梅;肿瘤细胞中SHH通路与VEGF表达相关性的研究[D];重庆医科大学;2010年
4 冯晓雪;抑制脊髓Sonic Hedgehog信号通路对神经病理性疼痛模型大鼠痛敏的影响及机制探讨[D];重庆医科大学;2016年
5 张晔;注射用丹参多酚酸对实验性脑缺血小鼠神经功能改善和神经再生的影响及其作用机制的研究[D];河北医科大学;2015年
6 张聪;正丁基苯酞对脑梗死后神经功能恢复作用的机制研究[D];河北医科大学;2015年
7 刘东升;SHH-N信号通路及其靶基因N-myc对神经干细胞增殖的影响[D];大连医科大学;2011年
8 范娅丹;灯盏乙素与芍药苷配伍对脑缺血大鼠的治疗作用及其对Sonic Hedgehog信号通路的影响[D];遵义医学院;2017年
9 王大玮;甲状腺激素影响NKx6.1表达调控机制的初步探讨[D];天津医科大学;2016年
10 吴雅吟;从Shh通路探讨电针对缺血性脑卒中的神经保护作用与神经干细胞/祖细胞的影响[D];福建中医药大学;2014年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978