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中药高效液相色谱分析方法发展的理论基础研究

徐青  
【摘要】:中药是一个典型的复杂未知样品,其化学物质基础的阐明是中药现代化的关键科学问题之一。液相色谱是中药分析中应用最普遍的技术,也是进一步与质谱、核磁共振等联用的基本分离手段。本论文在总结了中药复杂体系的特点和分析中需要解决的问题后,提出了中药分析的思路,开展了线性梯度下的液相色谱保留值规律、峰形规律的研究,发展了快速获取液相色谱保留参数、峰形参数的方法,从而将未知样品快速转化为色谱已知样品。并以实际样品藏茵陈和黄芪为例,应用发展的方法建立了相应的液相色谱参数数据库,提供中药活指纹图谱的信息基础。同时,面向实际应用,发展了中药组分的目标优化方法。建立了液-质联用表征黄芪皂甙的方法,建立了高效液相制备色谱快速制备黄芪组分的方法并初步发现了具有诱导分化白血病细胞的组分。 发展了用五次线性梯度快速、准确地获取液相色谱保留值方程的方法。以线性梯度a、c 值预测任意梯度下的溶质的保留时间,并发展了基于内标峰的校正方法。应用于藏茵陈和黄芪样品的色谱保留参数获取,对c-a 关系进行了考察。 基于EMG模型和自动曲线拟合技术,首次建立了以线性梯度快速获取液相色谱液相色谱峰形参数和峰形规律的方法。以线性梯度峰形规律预测了任意梯度条件溶质的峰形参数,结果表明预测值与解析值基本一致,可应用于全谱图拟合和谱图仿真。以藏茵陈氯仿组分为例,在不同梯度条件的分析谱图进行了解析,结果表明拟合定量方法具有较高的定量精确度。 应用移动重叠分辨分离图和谱图仿真技术,发展了液相色谱目标优化的方法,以藏茵陈提取组分和黄芪乙酸乙酯组分为例,系统阐述了液相色谱分析的目标优化过程,实现了目标的优化分离。 对黄芪皂甙类组分进行了液相色谱-质谱分析,获取了皂甙的分子量和结构信息并推断可能的结构。快速组分分离结合白血病细胞模型上的活性筛选,对药效物质基础进行了探索性研究。


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