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荧光假单胞菌抗铜基因簇的表达调控及其致病性分析

胡永华  
【摘要】: CopRS/CopABCD是细菌用以维持铜内环境稳定的一个系统,虽然已在荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)中发现了CopRS/CopABCD系统的同源物,但其潜在的功能还未知。本实验在一个鱼类致病菌P. fluorescens(TSS)中鉴定到了一个基因簇,由copR、copS、copC和copD组成,但缺乏copAB。copR、copS、copC和copD基因的敲除实验发现copRSCD基因簇与TSS抗铜性相关,而且copRS操纵子和copCD操纵子在转录水平上受亚抑制水平的铜诱导。双元调控系统中的调控蛋白CopR不仅激活copCD表达,而且还激活copRS的表达。凝胶滞缓实验显示CopR能直接与copCD和copRS的启动子区域结合。干扰copR的正常表达不仅影响细菌的生长,而且还影响到细菌生物膜的形成、对鱼的侵染力和在组织中的存活力。本实验还筛选到一个CopR的突变体C104,该突变体因缺失N端的信号接受域而成为一个具有组成性活性的调控蛋白,C104在TSS中表达时导致菌株的毒力降低。本实验所发现的P. fluorescens CopR与细菌致病力之间的关系以前未见报道。


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