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大鼠附睾特异性基因ESc-615和HongrES1的研究

胡志红  
【摘要】: 本论文分为两部分,第一部分是“附睾特异性基因ESc-615的研究”。ESc-615是本实验室克隆到的一个猕猴附睾特异性表达的新基因。为得到该基因在大鼠中的同源基因,采用了筛选大鼠附睾cDNA文库的方法,得到了猕猴附睾ESc-615在大鼠附睾中的同源基因。它的cDNA全长为2147bp,从cDNA序列推测的蛋白含575个氨基酸残基,并具有B型羧基酯酶激活位点和B型羧基酯酶信号这两个羧基酯酶保守结构域,与猕猴ESc-615有78%的同源性。原位杂交显示此基因在整个附睾中均有表达,但在附睾起始区信号很弱,其后逐渐增强,附睾尾部最强。阉割实验发现该基因受雄激素调控。为了从蛋白水平深入研究ESc-615蛋白的功能,我们制备了抗猕猴ESc-615蛋白中一个肽段的抗体,该肽段含310个氨基酸残基;免疫组化结果表明该蛋白是分泌蛋白,能与精子结合。说明ESc-615有可能在精子正常功能的发挥中起着作用。 第二部分是“大鼠附睾特异性基因HongrES1的研究”。通过筛选大鼠附睾cDNA文库,得到了大鼠附睾特异性表达的基因HongrES1。原位杂交显示它只在附睾尾部后端表达。其cDNA全长为1590bp,从cDNA序列推测得到的蛋白质长度为415个氨基酸残基;结构分析表明HongrES1是丝氨酸蛋白酶抑制剂家族的一个新成员,HongrES1在雄性生殖中的功能还待进一步研究。与HongrES1一起筛库得到的另一个附睾尾部特异性表达基因HongrES2的序列还待进一步确定。


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