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川楝素对钙通道细胞内钙浓度和神经递质释放装置钙离子敏感性的影响

许彤辉  
【摘要】:从驱蛔中药楝属植物根皮中提取的三萜化合物川楝素.(toosendanin C30H38O11,FW.574, TSN) 是一种选择性影响神经递质释放.阻遏神经肌肉和 中枢突触传递的突触前阻断剂.TSN还具有显著的抗肉毒作用.并能诱导细胞 分化.凋亡.鉴于TSN主要生物学效应与胞内外钙离子密切相关.本文以不同 方法研究了TSN对运动神经末梢钙电流.细胞胞内钙浓度.([Ca2+]i)以及对神经 递质释放装置钙敏感性的影响.以期阐明TSN的作用机制.主要结果如下. 1. 利用神经周膜下记录方法.在青蛙胸皮肌标本上观察了TSN 对运动神 经末梢钙电流的影响.结果表明 TSN 能够增大青蛙末梢的慢钙电流.这种 作用可被 L 型钙通道特异阻断剂 nifedipine 阻遏. 2. 利用激光共聚焦显微镜钙成像技术.研究了TSN对NG108-15 细胞[Ca2+]i 的调控作用.施加TSN不仅可以增大高钾诱导的分化NG108-15 细胞胞内钙瞬 变.还能引起其静息的[Ca2+]i升高.该效应依赖于胞外钙离子.并可以被 nifedipine去除. 3. 通过酶联荧光法.以大鼠脑皮层突触体为神经末梢标本.观测了TSN对 中枢突触主要兴奋性递质谷氨酸 (Glu)释放的影响.发现TSN浓度.时间依赖 地显著抑制由高钾诱发的依钙性Glu释放.由钙离子导体A23187 直接提升 [Ca2+]i而诱发的Glu释放也被TSN明显抑制. 从以上的实验结果推断.TSN通过对外周及中枢L型钙通道介导的钙电流的 易化作用提高[Ca2+]i导致胞内钙离子超载 使递质释放装置对钙的敏感性降 低 最终神经递质释放受到抑制.SN抗肉毒和诱导细胞分化.亡的作用可 能也与其引起的[Ca2+]i升高有关.


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