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1.通过基因工程技术培育高产优质水稻品系 2.草坪草高效遗传转化体系的建立

曹明霞  
【摘要】:两个增产相关基因[透明颤菌血红蛋白基因(VHb)和农杆菌玉米素合成酶基因(tzs)],一个抗除草剂草甘膦基因[突变的5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS)基因],一个报告基因(gus)和一个筛选标记潮霉素磷酸转移酶基因(hpt),各自形成独立的表达框串联在一个双元载体的T-DNA 区,利用根癌农杆菌介导,被同时导入水稻基因组。五个外源基因的共整合频率达到90.2%,共表达频率可达85%。外源基因以低拷贝(1-3)稳定地整合,并按孟德尔方式稳定遗传到转基因后代。基于多基因的共整合和共表达,大量的转基因水稻株系可用于田间实验和育种研究。田间实验结果表明转基因株系在株高、穗长、每穗总粒数和每穗实粒数的性状上和对照相比有显著性改良提高;转基因水稻植株获得了明显的对除草剂草甘膦的抗性。另外,从基因工程技术本身需要和生物安全性角度考虑,有必要去除转基因植株中的筛选标记基因。来源于成纤维细胞生长因子FGF-4的含12 个氨基酸的穿膜序列(MTS)用于介导Cre 重组酶进入水稻细胞,将设计在两个loxP 位点间的报告基因(gus)和潮霉素磷酸转移酶基因(hpt)通过位点特异性重组从植物基因组中切除,结果得到只携带目的基因的转基因水稻,从而在一定程度上消除转基因作物的安全隐患,促进其的推广应用。


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