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农杆菌介导大豆高效遗传转化及热激控制转基因植物中外源基因的去除

刘海坤  
【摘要】:本研究建立了大豆胚尖的高效再生体系,和子叶节系统及下胚轴系统相比较, 这个系统具有高效和快速的再生特点, 利用根癌土壤农杆菌EHA105/pCAMBIA2301 对来自大豆成熟种子的胚尖外植体进行遗传转化,对农杆菌侵染时间长短,及乙酰丁香酮(AS)等影响转化频率的条件进行了探讨。发现浸染时间以20h 为佳,此时T-DNA 的整合频率可达78.2%,乙酰丁香酮最佳浓度为200μmol/L,并探讨了恢复培养的重要性。分别从3个大豆品种合丰35、合丰39、东农42 得到了转基因植株,GUS 染色及Southern 杂交结果证明外源基因已整合到大豆基因组中,获得转基因大豆的频率达8.0%~15.8%。


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