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小鼠受精前后转录相关事件的研究

孙峰  
【摘要】: TAF1(TBP相关因子1)是一种通用转录因子。对TAF1的功能进行RNAi干扰可引起胚胎早期发育广泛的转录缺陷。为了研究TAF1在胚胎早期的基因转录沉默和合子基因转录激活中的可能作用,我们采用免疫荧光研究了TAF1在小鼠1细胞胚胎中的表达情况。在受精后4小时的小鼠1细胞胚胎中没有检测到TAF1的表达,它在受精6小时后开始出现在原核中,并且核内其浓度在合子基因转录激活前达到相当高的水平;同时雄原核内的浓度高于雌原核内的浓度.这些观察表明在胚胎发育初期,除了TBP以外,另一个关键的通用转录因子TAF1也是不存在或是处于非常低的水平,这些关键的通用转录因子的缺失或不足可能导致了基因转录的沉默。 SRG3是SWI/SNF复合体中的核心亚单位之一。当SRG3被敲除而缺失时,胚胎发育便停止在植入阶段,提示SRG3和染色质重塑进程在早期小鼠发育中可能起着重要作用。为了更好的理解早期发育阶段的染色质重塑过程,本研究采用免疫荧光和western blot方法检查了卵母细胞发育和早期胚胎发育过程中SRG3的表达情况.结果发现SRG3在卵母细胞生长和成熟的过程中都表达,受精后SRG3在原核形成后的很短时间内也能检测到;SRG3蛋白在核内浓度随着时间增加而增加;在雄原核内的浓度高于雌原核内的浓度;SRG3的核内浓度随着时间增加能够部分的被蛋白合成的抑制剂所抑制,但是不能被转录抑制剂抑制。SRG3的表达和SWI/SNF复合体的另两个核心亚单位相一致。这些染色质重塑因子和转录因子TBP和SP1在小鼠胚胎中时间和空间上的表达是相一致的,说明了这些染色质重塑因子在早期发育过程中对染色质结构和功能起着重要作用。


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