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棉铃虫核多角体病毒的传播动态及含SOD重组病毒的构建

周明哲  
【摘要】:本论文包括 2 个部分。 第一部分报道了野生型棉铃虫核多角体病毒(Helicoverpa armigera single nucleocapsid nucleopolyhedrovirus, HaSNPV)和重组病毒 HaSNPV-AaIT(表达昆 虫特异性蝎毒基因 AaIT;杀虫速度增加)的水平传播和垂直传播动态研究。在 罩笼实验和田间开放实验中,两种 HaSNPV 水平传播能力随着感染幼虫龄期的 增加而增强,在感染幼虫密度较高时(每株 1 头),病毒传播能力更强;重组病 毒的水平传播率都显著性低于野生型病毒。根据实验数据确立了传播系数 ν,并 用于田间对宿主昆虫种群数量的预测。在实验室中,HaSNPV-AaIT 的垂直传播 率(感染雌蛾后代的死亡率)为 16.7 ± 2.1%,显著性低于野生型病毒(30.9 ± 2.9%);感染雄蛾中没有垂直传播率。同样,在田间重组病毒的垂直传播率(8.4 ± 1.1%)低于野生型病毒(12.6 ± 2.0%)。实验结果说明,重组病毒在棉铃虫中 的传播能力低于野生型 HaSNPV;作为生物杀虫剂使用,HaSNPV-AaIT 在环境 中的残留能力较差,影响了其长期杀虫效力,但是重组病毒的环境安全性更高。 第二部分针对杆状病毒的活性在田间受植物表面分泌的化学物质影响的特 点,分析了 HaSNPV 的超氧化物歧化酶 sod 基因的特点并与其它 9 种核多角体 病毒(NPV)和 4 种颗粒体病毒(GV)的 sod 基因编码产物进行了同源性比较。 克隆了 HaSNPV 的 sod 基因并进行了原核表达,结果表明原核表达的 SOD 酶具 有氧自由基的歧化活性。通过生测实验,证实 SOD 酶对棉铃虫病毒在棉叶上的 感染性有增强作用。构建缺失 sod 基因以及超表达 SOD 酶的重组病毒,可以进 一步分析 HaSNPV 的 sod 基因功能,并利用 SOD 酶与多角体蛋白融合表达,解 决棉铃虫病毒在棉花表面因次生代谢产物作用而迅速失活的问题。构建了组建这 两个重组病毒的中间载体,目前正在筛选重组体。


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