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SPR生化分析系统在SARS病毒检测中的应用研究

王于杰  
【摘要】: 2003年春季SARS病毒肆虐北京,严重威胁人民的生命安全,探索快速检测SARS病毒的方法成为一项紧迫任务,为此提出了本项研究。 SPR生化分析系统是崔大付课题组根据表面等离子体谐振原理自行研制的、多种型号的具有自主知识产权的新型分析系统。为了快速、准确地检测SARS病毒,研制出两种用于SARS病毒检测的SPR生物芯片,利用SPR生化分析系统进行了SARS病毒抗原、抗体的检测研究。 研制出羧甲基葡聚糖修饰的SPR生物芯片,建立了蛋白分子在此芯片上固定条件的测定方法;在此种芯片上进行了抗原、抗体、生物素标记的核酸和EPO受体细胞的固定或检测。 研制出葡聚糖修饰的参比型SPR生物芯片,该芯片采用独创的修饰方法,使芯片上的检测与参比位点可以位于一个通道内。检测位点可以牢固固定蛋白;参比位点活化后也不与蛋白结合,参比效果良好,适用于对细胞培养液、血清等复杂溶液的检测。 创新性地将参比型SPR生化分析系统用于SARS病毒的检测,研制出一种SARS病毒抗原检测芯片和一种抗SARS病毒抗体检测芯片,两者都可以进行生物样品的直接检测。SARS病毒抗原检测芯片的检测灵敏度为1.66×10~4PFU/ml,接近临床检测需求,深入研究将有利于对SARS病人进行早期诊断。 论文中的SARS检测芯片的制备方法也可以推广到其它病毒检测芯片的制备。为了缩短新型病毒抗原检测芯片的研制周期,应对突发性医疗事件,降低芯片成本,还进行了利用抗血清取代单抗制备SARS抗原检测芯片的研究。 本研究为参比型SPR生化分析系统在临床病毒检测方面的推广应用进行了芯片制备与病毒检测方面的技术储备。


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