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天然叶黄素对黄颡鱼生长性能、皮肤着色和抗氧化功能的影响及其在鱼体组织中代谢规律的研究

王鲁波  
【摘要】:本文以万寿菊提取的天然叶黄素(xanthophylls from marigold)为受试物,以黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)为研究对象,通过3个试验,分别研究膨化挤压工艺对天然叶黄素的损耗以及饲料中的色素在水中的溶失对水环境的影响;天然叶黄素对黄颡鱼生长性能、皮肤着色、血清生化指标和抗氧化功能、肝脏组织学的影响;以及天然叶黄素在黄颡鱼体内的蓄积代谢规律等,确定万寿菊提取的天然叶黄素作为饲料添加剂在水产动物上应用的有效性和安全性。本研究共包括3个试验,主要研究结果如下: 1.以源自万寿菊的天然叶黄素(购自广州立达尔生物科技股份有限公司,含量为4.64%,其中黄体素4.0%,玉米黄质0.19%)为受试物,分别在基础饲料中添加0%,0.15%,0.3%,0.6%,8%,叶黄素理论值分别为0,69.6,139.2,278.4,3700mg/kg。原料经粉碎和充分混匀后,在喂料区:90℃5s,揉合区:130℃3s,熟化区:60℃4s的工艺参数下经挤压膨化工艺制成2mm的膨化沉性颗粒料,并采用高效液相色谱法检测饲料中总叶黄素含量分别为0(检出限=0.5mg/kg)、24.2、54.2、118、1700mg/kg,依次命名为C、L24.2、L54.2、L118、L1700。计算膨化工艺对天然叶黄素的损耗率平均为43.40%。选择C、L24.2、L1700组以5个重复为单位分别进行溶失30min、1h、2h、24h的溶失实验,结果表明天然叶黄素水中溶失率达到99%的时间在30min以内,由于黄颡鱼为快食性鱼类,叶黄素的快速溶失,对水环境以及黄颡鱼正常摄入和色素积累不会造成显著影响,但不适宜在慢食性水生动物,如虾类饲料中添加。 2.用上述5组饲料饲喂初始体重为21.00±0.01g的黄颡鱼,经90天的生长试验发现,各组存活率没有显著差异。添加天然叶黄素的4个剂量组的特定生长率和饲料效率、L24.2组的蛋白沉积率、L54.2组和L118组及L1700组的能量沉积率均显著高于对照组(P0.05)。体侧和腹部皮肤的黄度(b~*)和饱和度(C~*)随饲料中天然叶黄素含量的增加而逐步升高,L118组可达到饱和,并与L1700组之间没有显著差异(P0.05),L118组和最高剂量组皮肤中黄色素过度沉积,并向肌肉中转移。皮肤中叶黄素的蓄积系数呈现先升高后下降的趋势,蓄积系数达到最高时对应的添加量为76.25mg/kg饲料。血清CHO随着叶黄素添加剂量的增加呈上升趋势,其中L54.2、L118、L1700显著高于对照组(P0.05)。L1700组的HDL-C显著高于对照组C(P0.05),L24.2、L54.2、L118组较对照组均没有显著差异(P0.05)。观察肝脏组织切片发现4个叶黄素添加组均未对肝脏造成损伤。实验结果表明:1)24.2-1700mg/kg的天然叶黄素显著提高了黄颡鱼的生长性能;2)天然叶黄素作为黄颡鱼皮肤着色剂的最适剂量为76.25mg/kg饲料;3)本试验中天然叶黄素对黄颡鱼抗氧化功能没有显著影响,但显著促进了胆固醇的合成;4)参考欧盟EC No1831/2003和70/524/EEC中天然叶黄素在家禽饲料中的限量及本研究中的有效性剂量的结果,推荐天然叶黄素在黄颡鱼上饲料中添加的安全限量为100mg/kg饲料,安全系数为17倍。 3.以相同5组试验饲料饲喂初始体重为21.00±0.01g的黄颡鱼,日摄食率平均为1.3%,连续投喂56天,并分别在蓄积期7d,14d,21d,28d,42d,56d和消除期第9天取各组黄颡鱼的皮肤和肌肉样品,采用GB/T23187-2008高效液相色谱法检测其中总叶黄素含量。结果发现在蓄积期内L24.2的皮肤色素沉积不稳定,L54.2、L118、L1700的皮肤色素含量持续上升,且在9天的消除期后色素含量没有显著下降。L24.2、L54.2、L118肌肉中总叶黄素含量在35d时达到最高,而L1700则出现在42d。实验结果表明:1)56天内万寿菊叶黄素可以在黄颡鱼皮肤中持续沉积且不对黄颡鱼造成病理学损害;2)皮肤是黄颡鱼贮存色素的主要器官,肌肉仅起到暂时贮存的作用。


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