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gI/gE双基因缺失伪狂犬病病毒变异株的构建和免疫效力评价

王春花  
【摘要】:伪狂犬病(Pseudorabies, PR)又名奥耶兹氏病,是由猪疱疹病毒1型(Suid herpesvirus1, SuHV-1)亦称伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)引起的猪、牛、羊等多种家畜及野生动物的一种烈性传染病,其主要特征为奇痒、发热、脑脊髓炎、呼吸系统和神经系统障碍。猪是其主要的宿主和传染源。目前,免疫接种经典PRV Bartha-K61弱毒疫苗是防控伪狂犬病的有效途径之一。然而,近年来在我国很多地区的伪狂犬病疫苗免疫猪群中接连爆发了新的伪狂犬病疫情。研究表明,现行的Bartha-K61疫苗株不能对当前流行的PRV变异株提供完全免疫保护,并且PRV变异株还在继续流行,感染和发病猪场将进一步增多。因此,研制针对PRV变异株的疫苗十分紧迫。 本研究从天津某免疫过PR疫苗猪场的发病仔猪脑组织中分离到了一株PRV变异株(命名为PRV TJ株)。经序列比对分析,该毒株与近年来分离的PRV流行毒株位于进化树的一个独立分支,与经典强毒株PRV Kaplan株和Becker株的亲缘关系较远,其gE基因和gI基因序列均发生了氨基酸的突变、插入与缺失。猪和绵羊免疫攻毒试验结果显示,Bartha-K61疫苗不能对PRV TJ株感染的动物提供完全免疫保护。 本研究以PRV TJ株为亲本病毒,参照PRV Bartha-K61株的基因缺失部位,构建用于同源重组的转移载体,采用改进的方法拯救gI/gE双基因缺失病毒rPRVTJ-delgI/gE,对其进行PCR、间接免疫荧光试验(IFA)和测序鉴定,结果显示,该病毒已正确缺失gI和gE基因。经对其体外生长特性分析,该病毒在PK-15细胞上形成病毒蚀斑的速度较亲本病毒慢,蚀斑形态和大小没有明显差异,但该病毒的体外生长动力学比亲本病毒弱。 本研究还对该双基因缺失病毒rPRVTJ-delgI/gE进行了安全性和免疫原性评价。结果显示,将rPRVTJ-delgI/gE以不同剂量(103、104、105、TCID50)接种猪只(n=5)后,免疫猪未出现任何异常临床症状,产生了PRV特异性抗体,用PRV TJ株攻击后,不同剂量rPRVTJ-delgI/gE免疫猪产生的特异性抗体进一步升高,并持续到试验结束,产生的中和抗体水平显著高于Bartha-K61疫苗株免疫猪,而且rPRVTJ-delgI/gE免疫猪无临床症状、不排毒、无病理变化,均得到了完全保护,而Bartha-K61疫苗株免疫猪攻毒后出现了排毒和gE特异性抗体转阳,未得到完全保护。这表明,rPRVTJ-delgI/gE对猪只安全,具有良好的免疫原性,是一株很有希望的PRV基因缺失疫苗候选株,可望用于防控当前流行的伪狂犬病变异株。


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8 代卓见;伪狂犬病病毒分子生物学研究新进展[J];动物医学进展;1996年01期
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11 陈斌;伪狂犬病病毒及其免疫研究进展(上)[J];四川畜牧兽医;2001年08期
12 阪野哲也,王振杰;ADV与A·ppⅠ型混合感染时伪狂犬病活疫苗的有效性[J];动物医学进展;1994年01期
13 娄高明,韩文瑜,张玉静,赵建军,邹啸环;猪伪狂犬病病毒JL株的分离与鉴定[J];中国动物检疫;1998年02期
14 陈懿;聂奎;;伪狂犬病病毒囊膜蛋白gD研究进展[J];动物医学进展;2006年06期
15 ;科学纪事[J];中国基础科学;2000年05期
16 朱玲,郭万柱,徐志文;猪伪狂犬病基因缺失活疫苗(SA215)免疫母猪后仔猪母源抗体消长规律及首免日龄[J];中国兽医学报;2004年04期
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19 陈斌;伪狂犬病病毒及其免疫研究进展(下)[J];四川畜牧兽医;2001年09期
20 姜焱,陈溥言;伪狂犬病病毒的囊膜糖蛋白gE的研究进展[J];中国兽医杂志;2002年12期
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1 陈焕春;金梅林;何启盖;吴斌;方六荣;吴美洲;;伪狂犬病根除计划[A];猪的重要传染病防治研究新成果——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第五届理事会第二次全体会议暨防检疫专业委员会第7次学术交流会论文集[C];2002年
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3 林春丽;王英;张宝琚;乌日娜;韩小梅;袁智慧;;不同的保存条件对伪狂犬病毒感染力的影响实验[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(下册)[C];2010年
4 银梅;王新华;王选年;;伪狂犬病研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分第12次暨中国动物病理生理学专业委员会第11次学术讨论会论文集[C];2003年
5 洪思哲;;猪瘟与伪狂犬病混合感染及其诊治[A];福建省畜牧兽医学会2009年学术年会论文集[C];2009年
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10 张鲁安;李岩;陈磊;靳亚平;李舵;;新疆规模化猪场猪伪狂犬病血清学调查[A];首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集(2008)[C];2008年
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1 徐志文;猪瘟伪狂犬病重组病毒活疫苗的研究[D];四川农业大学;2003年
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3 汤亦斌;规模猪场种猪伪狂犬病的净化方案研究[D];湖南农业大学;2003年
4 唐万勇;仔猪伪狂犬病的病理学研究[D];华中农业大学;2003年
5 王春花;gI/gE双基因缺失伪狂犬病病毒变异株的构建和免疫效力评价[D];中国农业科学院;2014年
6 文昌清;浙江6个规模化猪场伪狂犬病血清学调查及3种伪狂犬疫苗免疫比较试验[D];南京农业大学;2011年
7 张术;伪狂犬病核酸疫苗及其佐剂的研究[D];第二军医大学;2005年
8 朱玲;伪狂犬病三基因缺失疫苗SA215免疫母猪后仔猪母源抗体消长规律及首免日龄的研究[D];四川农业大学;2001年
9 许家荣;猪细小病毒病、伪狂犬病和猪繁殖与呼吸综合征三联灭活疫苗的研制及田间试验[D];南京农业大学;2003年
10 张鲁安;新疆猪伪狂犬病流行病学调查及病毒株的分离鉴定[D];西北农林科技大学;2005年
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1 北京兽药研究所 王琴;伪狂犬病及其防治(未完待续)[N];中国畜牧水产报;2000年
2 ;伪狂犬病[N];河北科技报;2002年
3 北京兽药研究所 王琴;伪狂犬病及其防治(未完待续)[N];中国畜牧水产报;2000年
4 倪艳秀 林继煌;伪狂犬病[N];江苏农业科技报;2004年
5 北京兽药研究所 王琴;伪狂犬病及其防治(上接10月29日三版)[N];中国畜牧水产报;2000年
6 湖南农业大学教授 李文萍;伪狂犬病的诊断与治疗[N];湖南科技报;2002年
7 河北远征药业股份有限公司 赵茂华;大型养殖场应重视伪狂犬病的防治[N];中国畜牧报;2004年
8 临城县畜牧局 侯增海;新建猪场要严防伪狂犬病[N];河北科技报;2006年
9 王素军;猪瘟与伪狂犬病的感染[N];中国畜牧报;2003年
10 ;伪狂犬病双基因缺失活疫苗[N];河南科技报;2004年
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