大白菜抗芜菁花叶病毒病基因的RAPD分子标记研究

【摘要】： 大白菜（Brassica rapa L.ssp.pekinensis）是中国、日本、朝鲜等国家的 主要蔬菜之一。以芜菁花叶病毒（Turnip mosaic virus，TuMV）侵染为主的病毒病 是危害白菜生产最严重的病害之一，直接导致大白菜产量低、质量差。TuMV 由40多种蚜虫以非持续性方式传播，药剂防治成本高、效果差，并且污染产 品和环境。培育抗病品种被认为是最有效、无环境污染和可持续发展的途径。 因此，深入了解抗病毒病基因的遗传效应，获得其遗传模式的信息，并能将其 导入优良品种是很有必要的。而分子标记技术是抗性基因筛选和鉴定的最有用 工具之一。本研究以大白菜抗病与感病亲本杂交后自交所得的F_2群体为材 料，采用分离群体分群分析法（Bulked segregant Analysis，BSA），筛选与抗 性基因紧密连锁的RAPD分子标记，主要结果如下： 1．在温室隔离条件下进行苗期人工接种鉴定，对5叶期的幼苗接种TuMV-C_4 株系，目测和酶联检测的结果显示，F_2代的抗感分离比为3:1，计算的χ~2 =0.068，小于(χ~2)_(0.05(df=1))=3.84。这表明本研究所选用的这份抗性材料对 TuMV-C_4株系的抗性应该存在主效基因控制。 2．通过BSA方法，在300个随机引物中共有242个引物获得了扩增产物，出 现的谱带总数为1021条，平均每个引物扩增的谱带数为4.22条。筛选获得 一个在抗病池和感病池之间表现多态性的特异引物，OPV18，该引物扩增 出两条多态性谱带，片段长度分别为1400bp和820bp，分别命名为 OPV18_(1400)和OPV18_(820)。经χ~2检验，这两个标记带表现典型的3：1分离， 它们与抗性基因的遗传距离分别为9.5cM和15.36cM。 3．讨论了将分子标记用于品种选育和进一步克隆抗病基因的可能途径。