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固相包被用二抗的研制

郭伟正  
【摘要】: 采用杂交瘤技术,获得了四株抗兔IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞株 (其中RG48G_8一株为针对兔IgG Fc片段的单抗)。 采用亲和层析法纯化驴抗羊IgG抗体及驴抗兔IgG抗体,并将纯化 的二抗应用于固相包被管的制备。确定了包被条件:以0.1mol·L~(-1) PH4.8 柠檬酸缓冲液作为包被缓冲液,包被抗体浓度:驴抗羊二抗为10μg/ml, 驴抗兔二抗为 20μg/ml。建立了孕酮及 T_3的固相试管放射免疫分析方 法。其中,T_3固相试管放免分析法的灵敏度0.15ng/ml,批内变异系数 3.5%~13.0%,批间变异系数9.1%~11.2%,回收率103%~134%,该方法 与T_3固相微球放免分析法的血样测定值相关系数为0.786。孕酮固相试 管放免分析法的灵敏度0.17ng/ml,批内变异系数 2.2%~9.4%,回收率 88.1%~119%,该方法与孕酮固相微球放分析法的血样测定值相关系数 为0.943。


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